[发明专利]启脾丸及其半成品指纹图谱测定方法

说明书

本发明公开了一种启脾丸及其半成品指纹图谱的检测方法，本方法通过高效液相色谱法获得多批次的启脾丸成品指纹图谱，应用中药色谱指纹图谱相似度评价系统生成对照指纹图谱作为制剂的标准指纹图谱。启脾丸半成品的指纹图谱通过类似方法生成对照指纹图谱作为半成品的标准指纹图谱，上述测定方法可以定入启脾丸的质量控制标准，该方法能够客观的反应产品内在成分的变化，可以较为全面地控制产品的质量。

技术领域

本发明涉及一种中药的检测方法，具体涉及启脾丸指纹图谱检测方法。

背景技术

启脾丸由人参、白术、茯苓、甘草、陈皮、山药、莲子、山楂、六神曲、麦芽、泽泻等制成，具有健脾和胃之功效，主要用于脾胃虚弱，消化不良，腹胀便溏。制剂质量标准收载于2015版《中国药典》中。目前，启脾丸质量控制中有显微、薄层等定性鉴别，以及甘草的含量测定。现有质量标准指标对启脾丸质量监控较少，同时对生产过程中半成品药粉没有相关标准要求，从而导致该品种生产过程中不能全面监控质量，迫切需要一种在药品生产全过程中监控质量的方法。目前，原标准中尚无半成品及成品指纹图谱的检测，为了弥补上述不足，使其质量控制技术更加完善、科学，对启脾丸及其半成品指纹图谱进行研究，对连续十批的产品及半成品进行考察比较，建立该产品的指纹图谱HPLC方法，并最终确定启脾丸成品及其半成品标准图谱，为提高启脾丸产品质量控制奠定基础。

中药指纹图谱是一种综合的，可量化的鉴定手段，它是建立在中药化学成分系统研究的基础上，主要用于评价中药材以及中药制剂半成品质量的真实性和稳定性。中药及其制剂均为多组分复杂体系，因此评价其质量应采用与之相适应的，能提供丰富鉴别信息的检测方法，建立中药指纹图谱将能较为全面地反映中药及其制剂中所含化学成分的种类与数量，进而对药品质量进行整体描述和评价。在现阶段中药的有效成分绝大多数没有明确的情况下，中药指纹图谱的研究和建立，对于有效控制中药材或中成药的质量具有重要意义。

发明内容

为克服现有技术的不足，本发明的目的在于提供一种启脾丸及其半成品指纹图谱检测方法，通过实验方法研究，增加启脾丸半成品指纹图谱的测定方法，增强该产品有效性、质量可控性。

本发明的目的是通过下述技术方案来实现的：

一种启脾丸及其半成品指纹图谱的检测方法，该方法包括以下步骤：

(1)启脾丸成品指纹图谱检测

(a)启脾丸供试品溶液的制备：取启脾丸适量，剪碎、精密称定，加入水饱和正丁醇、甲醇、乙醇或与磷酸水溶液混合一定比例的甲醇、乙醇中的一种溶剂提取，定容，过滤，滤液作为供试品溶液；

(b)启脾丸供试品溶液的测定：吸取供试品溶液注入液相色谱仪，以高效液相色谱法采用梯度洗脱进行测定，得到启脾丸半成品的指纹图谱；

其中，高效液相色谱的色谱条件为：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；流动相A为含有0.1％～1％磷酸的水溶液，流动相B为乙腈或乙腈和甲醇的混合溶液，流动相B中流动相 A与流动相B的体积比随时间增加逐渐减少；检测波长为200～230nm。

上述高效液相色谱的检测波长优选203nm；色谱柱柱温为30～50℃，优选30℃；流动相 A为含有0.1％～1％磷酸的水溶液，优选为流动相A中磷酸占0.4％；流动相B中乙腈与甲醇的体积比是100∶0～50∶50，优选为乙腈与甲醇的体积比是90∶10。

上述高效液相色谱梯度洗脱的程序如下，其中下述比例均为体积比：

0～9min时，流动相A∶流动相B＝90∶10～80∶20

9～35min时，流动相A∶流动相B＝75∶25～85∶15

35～55min时，流动相A∶流动相B＝81∶19～65∶35

55～70min时，流动相A∶流动相B＝75∶25～55∶45