[发明专利]一种细胞外囊泡循环分离纯化平台及方法

权利要求书

1.一种细胞外囊泡循环分离纯化平台，其特征在于，包括样品管(1)、循环泵(2)、过滤器(3)、流速阀(4)和收集管(5)；所述样品管(1)与循环泵(2)连接，所述循环泵(2)通过至少一个入口(6)与过滤器(3)连接，所述循环泵(2)用于将待分离样液通过所述至少一个入口(6)泵入过滤器(3)；所述过滤器(3)中设置有滤膜(7)，所述滤膜(7)用于截留大于该滤膜(7)孔径的待分离样液中的细胞外囊泡，并用于过滤待分离样液中的杂质；所述滤膜(7)用于将截留的部分通过至少一个上出口(8)返回到样品管(1)中，所述上出口(8)与样品管(1)之间连接有流速阀(4)，所述流速阀(4)用于控制滤膜(7)截留的部分返回样品管(1)的速度；所述滤膜(7)用于将过滤的部分通过下出口(9)进入收集管(5)。

2.如权利要求1所述的细胞外囊泡循环分离纯化平台，其特征在于，所述滤膜(7)的孔径为30nm-1000nm，所述滤膜(7)为亲水聚碳酸酯膜或多孔氧化铝膜。

3.如权利要求1所述的细胞外囊泡循环分离纯化平台，其特征在于，所述入口(6)的数量为2-5个，所述上出口(8)的数量为2-5个。

4.一种多级细胞外囊泡循环分离纯化平台，其特征在于，包括依次连接的至少两级细胞外囊泡循环分离纯化平台；任一级所述细胞外囊泡循环分离纯化平台包括样品管(1)、循环泵(2)、过滤器(3)和流速阀(4)，所述样品管(1)与循环泵(2)连接，所述循环泵(2)通过至少一个入口(6)与过滤器(3)连接，所述循环泵(2)用于将待分离样液通过所述至少一个入口(6)泵入过滤器(3)；所述过滤器(3)中设置有滤膜(7)，所述滤膜(7)用于截留待分离样液中大于该滤膜(7)孔径的细胞外囊泡，并用于过滤待分离样液中的杂质；所述滤膜(7)用于将截留的部分通过至少一个上出口(8)返回到样品管(1)中，所述上出口(8)与样品管(1)之间连接有流速阀(4)，所述流速阀(4)用于控制滤膜(7)截留的部分返回样品管(1)的速度；

第一级至倒数第二级中任一级所述细胞外囊泡循环分离纯化平台的下出口(9)与下一级细胞外囊泡循环分离纯化平台的样品管(1)连接，最后一级细胞外囊泡循环分离纯化平台的下出口(9)与收集管(5)连接；各级所述细胞外囊泡循环分离纯化平台的滤膜(7)的孔径逐级减小。

5.如权利要求4所述的多级细胞外囊泡循环分离纯化平台，其特征在于，各级所述细胞外囊泡循环分离纯化平台的滤膜(7)的孔径均为30nm-1000nm，各级所述细胞外囊泡循环分离纯化平台的滤膜(7)均为亲水聚碳酸酯膜或多孔氧化铝膜。

6.如权利要求4所述的多级细胞外囊泡循环分离纯化平台，其特征在于，各级所述细胞外囊泡循环分离纯化平台的入口(6)的数量均为2-5个，各级所述细胞外囊泡循环分离纯化平台的上出口(8)的数量均为2-5个。

7.运用权利要求1-3任一所述的细胞外囊泡循环分离纯化平台进行分离纯化细胞外囊泡的方法，其特征在于，包括以下步骤：

S1：将待分离样液加入样品管(1)中，所述待分离样液通过循环泵(2)从入口(6)泵入过滤器(3)中；

S2：所述待分离样液中孔径小于滤膜(7)孔径的杂质通过滤膜(7)，并通过下出口(9)进入收集管(5)中；所述待分离样液中孔径大于滤膜(7)孔径的细胞外囊泡被截留，并通过上出口(8)流经流速阀(4)，然后返回至样品管(1)中，进行循环纯化，得到纯化浓缩的细胞外囊泡。

8.如权利要求7所述的分离纯化细胞外囊泡的方法，其特征在于，所述步骤S1中待分离样液通过循环泵(2)的速度大于步骤S2中细胞外囊泡流经流速阀(4)的速度。