[发明专利]一种即用型免疫组化染色液及其制备方法和应用

说明书

本发明公开了一种即用型免疫组化染色液及其制备方法和应用。本发明提供了一种即用型免疫组化染色液，所述染色液包括A液和B液，所述A液包括二氨基联苯胺盐酸盐、弱酸性缓冲液体系、还原剂和溶剂，所述B液包括显色电子受体、弱碱性缓冲液体系、稳定剂和表面活性剂；所述A液和B液的体积比为1：50～100。该即用型免疫组化染色液的抗自氧化效果优异，酶促显色反应稳定性强，保存时间长，可以持续使用，不需要现用现配，能够有效减少免疫组化非特异性背景着色的染色液；另外，该染色液的制备方法简单，使用方便，降低了实验误差，提高了实验效率和实验结果的精确度，具有非常广泛的市场推广应用前景。

技术领域

本发明属于免疫组化染色技术领域。更具体地，涉及一种即用型免疫组化染色液及其制备方法和应用。

背景技术

过氧化物酶(HRP)是免疫学、生物化学上应用非常广泛的一种生物酶，免疫学检测系统中常用过氧化物酶标记抗体，在过氧化物存在下，过氧化物酶催化二氨基联苯胺可以产生光学和电子显微镜及比色法或肉眼下可见显色底物的化合物，该化合物不溶于水、不溶于一般有机溶剂，在免疫组化领域是最常用的显色反应。

免疫组织化学检测系统为在样品中加入一抗使与特异性位点抗原特异性发生反应，再加入用过氧化物酶标记的二抗抗体，充分反应后再次洗去标记和未标记的游离二抗抗体，最后加入底物显色，底物颜色深浅反映过氧化物酶标记物的多少，也就反映样品抗原(抗体)的多少。

目前，常规的二氨基联苯胺盐酸盐(DAB)染色液自氧化反应非常迅速，会造成很深的免疫组化非特异性背景着色，且染色液的稳定性差、保存时间短、需要现用现配，使用步骤繁琐。现有专利(CN105164272A)公开了一种使用过氧化物酶标记抗体的染色用含DAB底物试剂盒，该试剂盒能够用于过氧化物酶标记抗体的免疫组织化学染色、免疫细胞化学染色等免疫染色以及原位杂交中的显色反应。但是，该试剂盒中的染色液仍然存在很严重的自氧化，以及显色反应后非特异性背景着色，造成实验结果的精确度差。

因此，亟需提供一种保存时间长、抗自氧化效果优异、酶促显色反应稳定性强、以及能够有效减少免疫组化非特异性背景着色的染色液。

发明内容

本发明要解决的技术问题是克服现有染色液的上述缺陷和不足，提供一种即用型免疫组化染色液及其制备方法和应用。

本发明的目的是提供一种即用型免疫组化染色液。

本发明另一目的是提供所述染色液的制备方法。

本发明又一目的是提供所述染色液在免疫组化染色中的应用。

本发明又一目的是提供所述染色液在降低免疫组化非特异性背景着色中的应用。

本发明再一目的是提供一种降低免疫组化非特异性背景着色的方法。

本发明上述目的通过以下技术方案实现：

本发明提供了一种即用型免疫组化染色液，所述染色液包括A液和B液，所述A液包括二氨基联苯胺盐酸盐、弱酸性缓冲液体系、还原剂和溶剂，所述B液包括显色电子受体、弱碱性缓冲液体系、稳定剂和表面活性剂；所述A液和B液的体积比为1：50～100。