[发明专利]一种耐硫酸铵的木糖苷酶突变体V322DH328DT329E有效
申请号: | 201911269838.X | 申请日: | 2019-12-11 |
公开(公告)号: | CN111004789B | 公开(公告)日: | 2021-10-15 |
发明(设计)人: | 周峻沛;黄遵锡;张蕊;李娜;韩楠玉;唐湘华 | 申请(专利权)人: | 云南师范大学 |
主分类号: | C12N9/24 | 分类号: | C12N9/24;C12N15/56;C12N15/70;C12N1/21;C02F3/34;C12R1/19 |
代理公司: | 北京众合诚成知识产权代理有限公司 11246 | 代理人: | 邹仕娟 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 硫酸铵 糖苷酶 突变体 v322dh328dt329e | ||
1.一种耐硫酸铵的木糖苷酶突变体V322DH328DT329E,其特征在于,所述的突变体V322DH328DT329E由木糖苷酶序列AQM74402第322位的缬氨酸、第328位的组氨酸以及第329位的苏氨酸分别突变为天冬氨酸、天冬氨酸以及谷氨酸得到,其中,木糖苷酶序列AQM74402的氨基酸序列如SEQ ID NO.3所示;
所述突变体V322DH328DT329E的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。
2.权利要求1所述的突变体V322DH328DT329E的编码基因v322dh328dt329e,其特征在于,所述的编码基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示。
3.一种重组载体,其特征在于,包含权利要求2所述的编码基因。
4.一种重组菌,其特征在于,包含权利要求2所述的编码基因。
5.权利要求1所述的木糖苷酶突变体V322DH328DT329E的制备方法,其特征在于,包括以下步骤:
1)合成突变体V322DH328DT329E的编码基因v322dh328dt329e;
2)将1)中合成的序列和表达载体pEasy-E1相连接,即可获得包含v322dh328dt329e的表达载体;
3)将连接产物转化大肠杆菌BL21(DE3),获得表达V322DH328DT329E的重组菌株;
4)培养重组菌株,诱导木糖苷酶突变体V322DH328DT329E表达;
5)回收并纯化所表达的木糖苷酶突变体V322DH328DT329E。
6.权利要求1所述的突变体V322DH328DT329E在农业、制革和污水处理中的应用。
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