[发明专利]一种穿黄制剂指纹图谱及组分含量测定方法

说明书

本发明提出了一种穿黄制剂指纹图谱的建立方法，包括如下步骤：S1.供试品溶液的制备：取1.0g穿黄制剂粉末，精密称定，置于25mL容量瓶中，加入70％甲醇20mL，超声，放冷，定容至刻度，摇匀，过滤，取续滤液，离心，取上清液过微孔滤膜，即得；S2.高效液相色谱检测：吸取上述供试品溶液，注入高效液相色谱仪中进行高效液相色谱检测，记录65min内的指纹图谱。本发明采用高效液相色谱结合紫外双波长切换检测方法，建立了一个既可测定穿黄制剂的特征指纹图谱，该方法准确、高效、重复性及稳定性好，指纹图谱特征性强，含量测定结果准确，可作为穿黄制剂的质量控制方法。

技术领域

本发明涉及中药检测技术领域，具体涉及一种穿黄制剂指纹图谱及组分含量测定方法。

背景技术

穿黄制剂是由穿心莲和一枝黄花两味药材制成的中成药，因抗菌谱广泛，被喻为最安全的中药抗生素。具有清热解毒、抗菌消炎、消肿止痛、清上焦火的功效。制剂中穿心莲具有清热解毒、消炎、抗病毒作用，一枝黄花具有抗炎抗菌、疏风泄热、解毒消肿、促进白细胞吞噬的功能。两者协同用于治疗急性上呼吸道感染、急性扁桃腺炎、咽喉炎等热毒壅盛者。目前穿黄制剂的质量控制方法除了原标准对穿心莲及一枝黄花的薄层鉴别及对脱水穿心莲内酯的含量测定外，文献报道的也只有对该制剂中穿心莲内酯和脱水穿心莲内酯的含量测定方法。显然，现有的质量控制方法仍存在一定的局面性，并未能达到较全面控制穿黄制剂质量的目的。据文献报道，穿心莲药材中除穿心莲内酯和脱水穿心莲内酯外，新穿心莲内酯和脱氧穿心莲内酯含量也很高，并且这两种成分也是穿心莲抗炎、抗病毒的有效成分，因此也应该纳入穿黄制剂质量控制的指标成分中。研究显示，一枝黄花中含有绿原酸等多种咖啡酰奎尼酸类成分。这些成分有明显的抗炎解热、抗菌、抗病毒的药理活性，其抗炎活性比常见的抗炎药阿司匹林还要强，其抗病毒活性及对病毒引起的呼吸道感染的抑制作用效果尤其显著，这些成分均为该制剂的功效相关成分。

发明内容

本发明提出一种穿黄制剂指纹图谱及组分含量测定方法，利用该方法，可以准确、高效、重复性及稳定性好的含量测定穿黄制剂中各组分含量，可作为穿黄制剂的质量控制方法。

本发明的技术方案是这样实现的：

本发明提供一种穿黄制剂指纹图谱的建立方法，包括如下步骤：

S1.供试品溶液的制备：取1.0g穿黄制剂粉末，精密称定，置于25mL容量瓶中，加入70％甲醇20mL，超声30min，放冷，定容至刻度，摇匀，过滤，取续滤液，13000r·min^-1离心，取上清液过0.45μm微孔滤膜，即得；

S2.高效液相色谱检测：吸取上述步骤S1所得供试品溶液，注入高效液相色谱仪中进行高效液相色谱检测，记录65min内的指纹图谱；

其中，指纹色谱条件为：

采用Agilent Technologies EC-C18色谱柱，4.6mm×250mm，4μm，流动相：乙腈-0.2％磷酸水溶液系统；采用梯度洗脱方式：0min→10min→15min→20min→ 30min→40min→50min→65min；乙腈10％→15％→21％→25％→28％→34％→36％；流速1.0mL·min^-1；双波长切换时间序列采样：0～35min，323nm；35～65min，215nm；进样量5μL；柱温25℃；分析时间65min；理论塔板数以异绿原酸C峰计算不低于41000。

作为本发明的进一步改进，所述穿黄制剂粉末的制备方法如下：取穿黄清热片，去掉薄膜衣，研细过五号筛。

作为本发明的进一步改进，所述穿黄制剂粉末的制备方法如下：取穿黄清热胶囊，倾出内容物，研细过五号筛。