[发明专利]一种连翘指纹图谱质量控制体系的建立方法

说明书

本发明涉及药材质量控制技术领域，尤其是一种连翘指纹图谱质量控制体系的建立方法，包括包括以下步骤：对照品溶液制备；供试品溶液制备：取连翘药材粉碎过40目筛，取粉末约1g，精密称定，加入70％甲醇25mL置圆底烧瓶中，称定重量，回流提取30分钟，冷却至室温，再称定重量，用70％甲醇补足减失的重量，摇匀滤过，取续滤液，即得；化合物测定；指纹图谱的测定；聚类分析；指纹图谱的建立；色谱峰的指认。本研究建立的连翘药材指纹图谱方法稳定、可靠、重现性好，可为连翘药材的质量评价提供依据。

技术领域

本发明涉及药材质量控制技术领域，尤其涉及一种连翘指纹图谱质量控制体系的建立方法。

背景技术

本品为木犀科植物连翘Forsythia suspensa(Thunb.)Vahl的干燥果实。秋季果实初熟尚带绿色时采收，除去杂质，蒸熟，晒干，习称“青翘”；果实熟透时采收，晒干，除去杂质，习称“老翘”。分布于河北、山西、陕西、甘肃、宁夏、山东、江苏、河南、江西、湖北、四川及云南等省区。连翘具有清热解毒、消肿散结、疏散风热之功效，用于治疗痈疽、瘰疬、乳痈、丹毒、风热感冒、温病初起、温热人营、高热烦渴、神昏发斑、热淋涩痛等证。药理研究表明连翘具有良好的抗菌作用，连翘酯苷、连翘苷等均有很强的抗菌活性，连翘还具有抗病毒作用，同时还有解热、抗炎以及肝脏保护等作用。《中国药典》(2015年版)对连翘药材中连翘苷和连翘酯苷A的含量进行了控制。文献报道采用HPLC法测定连翘中连翘苷、连翘酯苷A和芦丁的含量，采用比色法测定总黄酮的含量，亦有釆用HPLC指纹图谱的技术评价连翘药材质量的报道。

《中国药典》(2015年版)规定本品含连翘苷(C₂₇H₃₄O₁₇)不得少于0.15％，含连翘酯苷A(C₂₉H₃₆O₁₅)不得少于0.25％。参考图10，由于指标含量范围较为广泛，这将为产品的质量稳定均一和临床安全有效性带来很大的隐患，需要更加严格控制药材的质量。

发明内容

本发明的目的是为了解决现有技术中指标含量范围较为广泛，将为产品的质量稳定均一和临床安全有效性带来很大隐患的缺点，而提出的一种连翘指纹图谱质量控制体系的建立方法。

为了实现上述目的，本发明采用了如下技术方案：

设计一种连翘指纹图谱质量控制体系的建立方法，包括以下步骤：

步骤一对照品溶液制备

准确称量2.00mg的对照品，分别置于10mL量瓶中，加入适量50％甲醇溶解，并以50％甲醇定容，得到质量浓度为200μg/mL的对照品贮备液，进样前将对照品贮备液用50％甲醇稀释10倍，上述对照品为连翘酯苷A(111831-200803)，连翘苷110809-200604)，(+)-表松脂素-4-O-β-D-葡萄糖苷，(+)-松脂素-4-O-β-D-葡萄糖苷；

步骤二供试品溶液制备

取连翘药材粉碎过40目筛，取粉末约1g，精密称定，加入70％甲醇25mL置圆底烧瓶中，称定重量，回流提取30分钟，冷却至室温，再称定重量，用70％甲醇补足减失的重量，摇匀滤过，取续滤液，即得；

步骤三化合物测定

通过HPLC-TOF/MS正负总离子流色谱图检测对照品溶液、供试品溶液，进行对比分析得出结果；

步骤四指纹图谱的测定