[发明专利]一种基于不同微生物细胞工厂异源表达酶的快速优化方法

权利要求书

1.一种优化微生物细胞工厂异源表达酶的方法，其特征在于，该方法包括：通过设计程序化实验的方法，分别测定不同外部环境因素下酶表达水平和微生物细胞工厂生长水平，并以最高酶表达水平作为酶参比水平，最高微生物细胞工厂生长水平作为细胞参比水平；选择酶表达水平达到酶参比水平至少90％且微生物细胞工厂生长水平达到细胞参比水平至少70％时的条件作为微生物细胞工厂异源表达酶的优化条件。

2.根据权利要求1所述的方法，其中，所述微生物细胞工厂包括细菌和/或真菌。

3.根据权利要求2所述的方法，其中，所述细菌为大肠杆菌、枯草芽孢杆菌和谷氨酸棒状杆菌中的至少一种。

4.根据权利要求2所述的方法，其中，所述真菌为酵母和/或丝状真菌。

5.根据权利要求2或4所述的方法，其中，所述真菌为毕赤酵母、酿酒酵母、黑曲霉和里氏木霉中的至少一种。

6.根据权利要求1所述的方法，其中，所述酶为D-阿洛酮糖3-差向异构酶。

7.根据权利要求1所述的方法，其中，所述微生物细胞工厂的获得方式包括：

(1)通过分子生物学手段将目标酶相关基因导入宿主细胞；

(2)经过稳定遗传验证后得到相应的微生物细胞工厂菌株。

8.根据权利要求1所述的方法，其中，所述外部环境因素包括培养基成分、温度、pH、金属离子辅因子的种类、金属离子辅因子的用量、诱导剂的种类和诱导剂的用量中的一种或多种。

9.根据权利要求1所述的方法，其中，所述程序化实验为单因素实验、正交实验和响应面实验中的一种或多种。

10.权利要求1-9中任意一项所述的方法在优化微生物细胞工厂异源表达蛋白中的应用。