[发明专利]检测与肺癌诊疗相关的外周血循环microRNA的引物及试剂盒

权利要求书

1.检测与肺癌诊疗相关的外周血循环microRNA的引物，其特征在于：

所述用于检测上述microRNA的引物包含逆转录引物，上游特异性引物和下游通用型引物组合；

其中，逆转录引物所示的单链DNA分子序列如下：

5'-GGATCGCCCTTGCTGTCAACGATACGCTACGTAACGGCATGACAGTG(T)n-3'；或者将上述核苷酸序列经过一个或几个核苷酸取代和/或缺失和/或添加并且具有相同功能的DNA分子；

所述上游特异性引物包括与下述序列：hsa-miR-16-5p、hsa-miR-26a-5p、hsa-miR-15b-5p、hsa-miR-21-5p、hsa-miR-191-5p、hsa-miR-195-5p、hsa-miR-223-3p、hsa-miR-92a-3p、hsa-let-7a-5p、hsa-let-7f-5p、hsa-miR-451a和hsa-miR-150-5p所对应的单链DNA分子序列中的一种或二种以上；或者将引物序列经过一个或几个核苷酸取代和/或缺失和/或添加并且具有相同功能的DNA分子；

所述下游通用型引物序列所对应的单链DNA分子如下：

5'-CCTTGCTGTCAACGATACGCTACG-3'；或者将上述序列经过一个或几个核苷酸取代和/或缺失和/或添加并且具有相同功能的DNA分子。

2.一种利用外周血循环microRNA进行肺癌早期诊断或预后监控的试剂盒，包括权利要求1所述的逆转录引物、特异性上游引物和通用型下游引物，以及用于逆转录反应试剂和定量PCR检测试剂。

3.如权利要求2所述试剂盒，其特征在于：检测样本为待检人员外周血液，对照样本为无肺癌的健康人群外周血液，从外周血液中提取Total RNA，基于实时定量PCR方法检测权利要求1中所述的一种或二种以上单链DNA分子。

4.如权利要求3所述试剂盒，其特征在于：根据定量PCR检测结果，与对照样本相比，如果待检人员外周血中循环miRNA浓度显著升高(P0.05)，并且差异倍数在2倍以上，可初步判断为肺癌高风险患者；

但此结果不能作为临床诊断依据，只能作为临床辅助诊断和筛查手段。