[发明专利]一种用高效液相色谱法测定达那唑有关物质的方法

说明书

本发明提供的一种用高效液相色谱法测定达那唑有关物质的方法，该方法采用反相C18柱，以弱酸性水溶液为流动相A，有机相为流动相B，进行梯度洗脱，本方法可对达那唑的有关物质进行快速、准确的定量分析。

技术领域

本发明涉及检测技术领域，具体的说是一种用高效液相色谱法测定达那唑有关物质的方法。

背景技术

达那唑，化学名称为17α-孕甾-2,4-二烯-20-炔并(2,3-d)异噁唑-17β-醇，结构式如下。达那唑是一种甾体杂环化合物，为雄激素17α-乙炔睾丸酮的衍生物，其主要制剂为达那唑胶囊，用于对其他药物治疗不能忍受或治疗无效的子宫内膜异位症，也可用于治疗纤维囊性乳腺病，并被推广应用到自发性血小板减少性紫癜、遗传性血管性水肿、系统性红斑狼疮、男子女性型乳房、青春期性早熟与不孕症。

达那唑结构式：

中国药典中收载的达那唑有关物质检测方法采用了液相色谱法；美国、英国、日本、印度等药典中收载的达那唑有关物质检测方法采用了薄层色谱法。相对于液相色谱法，薄层色谱法专属性较差，杂质检测灵敏度低，单个杂质无法准确定量；而中国药典所采用的液相色谱法杂质分离度较差，工艺杂质无法有效分离，杂质检出能力不足。

因此，有必要提供一种用高效液相色谱法测定达那唑有关物质的方法解决上述技术问题。

发明内容

针对现有技术中的问题，本发明的目的是提供一种用高效液相色谱法测定达那唑有关物质的方法，其优点是：提供一种快速、简便、可靠、有效的达那唑有关物质高效液相色谱分析方法。

本发明解决其技术问题所采用的技术方案是：一种用高效液相色谱法测定达那唑有关物质的方法，包括以下步骤：

步骤1：样品预处理，取达那唑样品适量，加稀释液溶解并稀释，配制成含达那唑0.1～3mg/mL的样品溶液；

步骤2：采用高效液相色谱法进行分析；

检测波长：210～280nm；柱温：20～50℃；进样量：5-50μL；

色谱柱：以十八烷基键合硅胶为填料的色谱柱；

流动相A：0.1～5％弱酸性水溶液；流动相B：有机相；流动相流速：0.5～ 1.5mL/min；梯度洗脱：0-5min，流动相A的体积含量保持60％，流动相B的体积含量保持40％；5-20min，流动相A的体积含量由60％变为50％，流动相 B的体积含量由40％变为50％；20-25min，流动相A的体积含量保持50％，流动相B的体积含量保持50％；25-30min，流动相A的体积含量由50％变为 45％，流动相B的体积含量由50％变为55％；30-40min，流动相A的体积含量保持45％，流动相B的体积含量保持55％；40-45min，流动相A的体积含量由45％变为30％，流动相B的体积含量由55％变为70％；45-65min，流动相A的体积含量保持30％，流动相B的体积含量保持70％；65-65.1min，流动相A的体积含量由30％变为60％，流动相B的体积含量由70％变为40％； 65.1-75min，流动相A的体积含量保持60％，流动相B的体积含量保持40％。

本发明进一步设置为：步骤1中，所述稀释液的浓度为30-70％v/v乙腈，优选50％乙腈。

本发明进一步设置为：所述检测波长优选为254nm。

本发明进一步设置为：所述柱温最佳为30℃。

本发明进一步设置为：所述色谱柱优选为SB-C18ZORBAX色谱柱，250*4.6mm，5μm。

本发明进一步设置为：所述进样量优选为10-20μl。

本发明进一步设置为：所述流动相流速：0.5～1.5mL/min，优选为 1.0mL/min。