[发明专利]生物体液多种类固醇激素的检测方法

权利要求书

1.一种生物体液多种类固醇激素的检测方法，其特征在于，包括以下步骤：

将含有待检测物的生物体液经过预处理，检测分析，得到生物体液多种类固醇激素的检测结果；

所述生物体液中含有类固醇激素；

所述预处理包括液液萃取。

2.根据权利要求1所述的生物体液多种类固醇激素的检测方法，其特征在于，所述液液萃取选自盐析辅助液液萃取、叔丁基甲醚萃取中的至少一种；

所述盐析辅助液液萃取中盐析辅助试剂包括饱和高价磷酸盐溶液和异丙醇；

其中，所述饱和高价磷酸盐溶液和异丙醇的体积比例为4:1～1:4。

3.根据权利要求1或2所述的生物体液多种类固醇激素的检测方法，其特征在于，所述液液萃取包括：

将液液萃取剂加入到待萃取物中，涡旋1～3分钟；

优选地，所述液液萃取包括：

将液液萃取剂加入到待萃取物中，涡旋1～3分钟，离心，复溶后涡旋。

4.根据权利要求1所述的生物体液多种类固醇激素的检测方法，其特征在于，所述生物体液包括血浆、血清、尿液和唾液中的至少一种；

所述类固醇激素选自皮质醇、可的松、11-脱氧皮质醇、皮质酮、脱氢表雄酮、睾酮、17-羟孕酮、雄烯二酮和孕酮中的至少一种。

5.根据权利要求1所述的生物体液多种类固醇激素的检测方法，其特征在于，所述检测分析包括：采用同位素内标定量法进行定量分析。

6.根据权利要求5所述的生物体液多种类固醇激素的检测方法，其特征在于，所述待检测物中包括类固醇激素的同位素内标物；

所述类固醇激素的同位素内标物选自类固醇激素的¹³C标记物或氘代标记物；

优选地，所述类固醇激素的同位素内标物包括d4-皮质醇、d8-可的松、d5-11-脱氧皮质醇、d8-皮质酮、d6-脱氢表雄酮、d3-睾酮、¹³C3-17-羟孕酮、d3-雄烯二酮、d9-孕酮中的至少一种。

7.根据权利要求5所述的生物体液多种类固醇激素的检测方法，其特征在于，采用同位素内标定量法进行定量分析包括：以标准品浓度为x轴，以标准品与内标物峰面积比为y轴绘制标准曲线。

8.根据权利要求1所述的生物体液多种类固醇激素的检测方法，其特征在于，所述检测分析包括：

将经过预处理的待检测样品采用液相色谱串联质谱法进行检测，采用同位素内标定量法进行定量分析，得到待检测物中的类固醇激素含量；

优选地，采用高效液相色谱串联质谱法进行检测。

9.根据权利要求8所述的生物体液多种类固醇激素的检测方法，其特征在于，液相色谱条件为：

色谱柱为反向色谱柱，流动相由流动相A和流动相B按比例组成进行梯度洗脱；

流动相A为体积分数为0.1％～2％的挥发性酸溶液或0.1mmol/L～2mmol/L挥发性缓冲盐溶液；

流动相B为体积分数为0.02％～0.2％甲酸的甲醇；

流动相的流速为0.3mL/min～0.5mL/min，柱温为35℃～45℃；

所述的挥发性酸溶液为甲酸、乙酸、三氟乙酸中的至少一种；

所述的挥发性缓冲盐溶液为甲酸铵、乙酸铵、氟化铵中的至少一种。

10.根据权利要求8所述的生物体液多种类固醇激素的检测方法，其特征在于，所述质谱条件为：采用电喷雾电离源，正离子模式，多反应监测扫描模式。