[发明专利]生物体液多种类固醇激素的检测方法

说明书

本发明公开了一种生物体液多种类固醇激素的检测方法，属于分析化学及临床检验技术领域，能够解决现有的类固醇激素检测方法检测时间长、检测效率低，检测灵敏度低的问题。通过将含有待检测物的生物体液经过预处理，检测分析，得到生物体液多种类固醇激素的检测结果；预处理包括液液萃取。本发明通过萃取去除蛋白及其他亲水性小分子杂质，降低了样本中其他杂质的干扰；采用非衍生化方法，简化操作步骤，提高重复性；且能同时测量九种类固醇激素的含量，检测结果准确、重复性和稳定性好。

技术领域

本发明涉及分析化学及临床检验技术领域，尤其是涉及生物体液多种类固醇激素的检测方法。

背景技术

类固醇激素是胆固醇经一系列酶催化产生的脂溶性小分子，具有维持新陈代谢、调节性功能等重要作用。类固醇激素在人体各种酶的催化下会相互代谢，不断产生或消耗，从而维持在一个动态的平衡状态。因此临床上需要准确检测每种类固醇激素的浓度，并了解其上下游产物直接的代谢关系。这能够为内分泌系统疾病、男/女性生殖系统疾病，肿瘤，生育功能等诊断提供帮助。但由于类固醇激素涉及分子种类多、结构类似、体内含量低，定量检测分析存在一定的难度。

目前，临床上多用免疫分析法检测类固醇激素，可以自动化操作，检测快速、成本低，其缺点是特异性差，容易出现交叉反应，不能区分检测结构类似物，而且一次只能检测一种类固醇激素，更重要的是，类固醇激素代谢通路中部分激素没有特异的免疫反应，因此这些激素不能通过免疫分析法进行检测。

发明内容

有鉴于此，本发明提供了一种生物体液多种类固醇激素的检测方法，能够解决现有的类固醇激素检测方法检测时间长、检测效率低，检测灵敏度低的问题。

为实现上述目的，本发明提供了如下技术方案：

一种生物体液多种类固醇激素的检测方法，包括以下步骤：

将含有待检测物的生物体液经过预处理，检测分析，得到生物体液多种类固醇激素的检测结果；

所述生物体液中含有类固醇激素；

所述预处理包括液液萃取。

通过液液萃取去除蛋白及其他亲水性小分子杂质，降低了生物体液中其他杂质的干扰。

作为本发明再进一步的方案：所述液液萃取选自盐析辅助液液萃取、叔丁基甲醚萃取中的至少一种；

所述盐析辅助液液萃取中盐析辅助试剂包括饱和高价磷酸盐溶液和异丙醇；

其中，所述饱和高价磷酸盐溶液和异丙醇的体积比例为4:1～1:4。

优选的，饱和高价磷酸盐溶液和异丙醇的体积比独立选自：4:1、3.5:1、3:1、2.5:1、2:1、1.5:1、1:1、1:1.5、1:2、1:2.5、1:3、1:3.5、1:4。

具体的，将所述饱和高价磷酸盐溶液和异丙醇的混合溶液记为SALLE试剂。

作为本发明再进一步的方案：所述液液萃取包括：

将液液萃取剂加入到待萃取物中，涡旋1～3分钟；

优选地，所述液液萃取包括：

将液液萃取剂加入到待萃取物中，涡旋1～3分钟，离心，复溶后涡旋。

具体的，液液萃取包括：将液液萃取剂加入到待萃取物中，震荡离心取上清液，氮气吹干，加入复溶液，震荡离心取上清液得待测样品。

优选的，复溶剂为50％-100％的乙腈溶液。

作为本发明再进一步的方案：所述生物体液包括血浆、血清、尿液和唾液中的至少一种；