[发明专利]一种检测人类乳腺癌易感基因分型的试剂盒及其使用方法与应用

说明书

本发明公开了一种检测人类乳腺癌易感基因分型的试剂盒及其使用方法与应用，所述试剂盒包括引物组，所述引物组分别针对人类乳腺癌易感基因的6个检测位点rs2241766、rs2273535、rs4680、rs4880、rs28897756和rs55770810设计的引物，具体包含对应的上游引物FAM、上游引物HEX和下游引物共3条引物；该试剂盒的使用方法为采用KASP技术针对人类乳腺癌易感基因的6个检测位点进行基因分型检测；该试剂盒及其使用方法具有检测灵敏度高、准确性高、所需的DNA样本要求量低、操作方便且成本低等优点。

技术领域

本发明涉及生物技术及医学领域，具体涉及一种检测人类乳腺癌易感基因分型的试剂盒及其使用方法与应用。

背景技术

乳腺癌是女性最常见的恶性肿瘤之一，根据其发病特性可以分为散发性乳腺癌和家族性乳腺癌。家族性乳腺癌患者是指一个家族中有两个或以上具有血缘关系的成员患有乳腺癌，其约占乳腺癌总体的20％，家族史是乳腺癌重要的危险因素之一，其可能是遗传基因和环境因素共同作用的结果。1990年，研究者发现了一种位于人体细胞核第17号染色体上的与遗传性乳腺癌相关的基因，并将其命名为乳腺癌1号易感基因，简称BRCA1。BRCA2位于染色体13q12.3区域，长84kb，含27个外显子，其编码的蛋白质也属于BASC复合体，负责启动双链DNA断裂修复。BRCA1/2是两种重要的抑癌基因，其在DNA的同源性重组修复机制中扮演了重要的角色。BRCA1/2基因突变约占家族性乳腺癌的15％～20％。目前，已报道的BRCA基因的突变类型包括无义突变、移码突变、同义突变、剪接位点突变及大片段缺失或重排等等。BRCA1/2基因有近4000个突变位点，这些突变点分散于各个外显子，目前还没有证据表明存在突变热点区域，只有少数几个突变频率较高的位点。

多数遗传性乳腺癌卵巢癌综合征(90％以上)是由BRCA1和BRCA2的胚系突变所引起的，BRCA基因的突变在乳腺癌、卵巢癌等疾病的遗传性中扮演着重要的角色。所以乳腺癌相关易感基因的突变检测对乳腺癌高危人群有非常大的意义，其可以评估乳腺癌等肿瘤的患病风险、指导乳腺癌患者的靶向用药和评估单侧乳腺癌患者的对侧乳腺癌风险等。

目前检测乳腺癌风险易感基因的方法有酶切、测序、荧光定量PCR技术等，然而，上述方法对DNA样本要求总量较高，实验操作费事、费力且成本高。因此，有必要发明一种对DNA要求量低、操作简单、低成本的人类乳腺癌风险易感基因分型的方法。

发明内容

本发明旨在至少解决现有技术中存在的技术问题之一。为此，本发明提出一种检测人类乳腺癌易感基因分型的试剂盒，能够用于人类乳腺癌易感基因分型检测。

本发明还提出试剂盒的使用方法。

本发明还提出一种非疾病治疗和诊断目的检测人类乳腺癌易感基因分型的方法。

根据本发明的第一方面实施例的一种检测人类乳腺癌易感基因分型的试剂盒，所述试剂盒包括引物组，所述引物组包括分别针对人类乳腺癌易感基因的6个检测位点rs2241766、rs2273535、rs4680、rs4880、rs28897756和rs55770810设计的引物，针对每个检测位点的引物包含对应的第一上游引物、第二上游引物和下游引物。

根据本发明的第一方面实施例的试剂盒，至少具有如下有益效果：该试剂盒具有操作简单、成本低，且检测所需的样本DNA需求量低、准确度和灵敏度高等优点。

根据本发明的一些实施例，所述引物组分别包括如下引物：

(1)针对rs2241766位点的引物序列如下：

第一上游引物Rs2241766FF(SEQ ID No.1)：

GAAGGTGACCAAGTTCATGCTAGTCGTGGTTTCCTGGTCATGC；

第二上游引物Rs2241766FH(SEQ ID No.2)：