[发明专利]一种大麻萜酚的提取分离方法

权利要求书

1.一种大麻萜酚的提取分离方法，其特征在于，步骤如下：

（1）以大麻的花叶部位为原料，粉碎制成30-50目颗粒后采用质量浓度60-80%的乙醇溶液热回流提取2-3次，每次回流提取1-3小时，合并提取液，减压浓缩回收乙醇，得乙醇提取浓缩液；

（2）待步骤（1）乙醇提取浓缩液冷却至常温后，加入一定量的正己烷萃取，将大麻萜酚萃取到有机溶剂相层中，收集合并有机溶剂相层，回收有机溶剂，得大麻萜酚萃取浓缩液；

（3）在步骤（2）的大麻萜酚萃取浓缩液中加入一定量的活性炭，升温搅拌，静置2分钟后用玻砂漏斗过滤，滤液浓缩抽干，得到大麻萜酚粗膏；

（4）在步骤（3）的大麻萜酚粗膏中加入质量浓度20-30%的乙醇，加热搅拌形成混悬液，静置冷却后取上清液过聚酰胺树脂柱，上样完后用纯净水洗脱杂质至流出液为无色，然后用质量浓度30-42%乙醇溶液洗聚酰胺树脂柱至流出液为无色，再用质量浓度55-60%的乙醇溶液洗脱至无杂质，最后用质量浓度65-80%的乙醇溶液洗脱收集大麻萜酚，分瓶收集，薄层鉴别后合并含有大麻萜酚目标物的洗脱液，减压浓缩回收乙醇，得聚酰胺层析大麻萜酚粗品；

（5）将步骤（4）聚酰胺层析大麻萜酚浓缩物用中性氧化铝干法拌样，上中性氧化铝柱，干法上样后，用氯仿-正己烷溶液洗脱除杂，然后用氯仿-乙酸乙酯-乙醇胺液洗脱大麻萜酚，收集含大麻萜酚目标物洗脱液，浓缩得大麻萜酚半成品，含量大于50%；

（6）将步骤（5）大麻萜酚粗品用甲醇溶解，过氨基键合硅胶柱、氰基键合硅胶柱或苯基键合硅胶柱，加压柱层析；

键合硅胶柱用质量浓度20%的甲醇溶液平衡后，使用质量浓度30%-42%的甲醇溶液洗2-3个柱体积，然后用质量浓度52-65%的甲醇溶液洗脱，最后用质量浓度72-85%的甲醇溶液洗脱，薄层层析鉴别，洗脱至无大麻萜酚斑点为止，对浓度72-85%的甲醇洗脱液进行薄层层析鉴别，合并含有大麻萜酚的洗脱液，浓缩得大麻萜酚半纯品；

（7）将步骤（6）中浓缩物用层析溶剂溶解，过聚酰胺类填料制备色谱柱，收集大麻萜酚段洗脱液，浓缩回收溶剂，即得到单体大麻萜酚溶液；

（8）步骤（7）中得到的浓缩液冷冻结晶，过滤；得到的晶体再用二次重蒸丙酮水溶解结晶，抽滤，晶体低温干燥得到大麻萜酚成品。

2.根据权利要求1所述的一种大麻萜酚的提取分离方法，其特征在于，所述步骤（1）中回流提取第一次提取添加原料质量7-9倍的乙醇溶液，其余提取添加原料质量4-5倍的乙醇溶液，浓缩温度75-80℃,真空度0.06-0.078MPa,浓缩至1/10体积。

3.根据权利要求1所述的一种大麻萜酚的提取分离方法，其特征在于，所述步骤（2）加入正己烷萃取，正己烷加入量为乙醇提取浓缩液的2-3倍，萃取次数为2-3次，合并萃取液浓缩至乙醇提取浓缩液体积的1/5。

4.根据权利要求1所述的一种大麻萜酚的提取分离方法，其特征在于，所述步骤（3）加入活性炭的量为大麻萜酚萃取浓缩液的2-8%，升温至40-50℃，搅拌15-20min。

5.根据权利要求1所述的一种大麻萜酚的提取分离方法，其特征在于，所述步骤（5）用正己烷-氯仿是正己烷、氯仿按体积比10:1溶液洗脱除杂；然后用氯仿-乙酸乙酯-乙醇胺溶液洗脱大麻萜酚，是氯仿、乙酸乙酯和乙醇胺按体积比10:1:1的比例混合制得。

6.根据权利要求1所述的一种大麻萜酚的提取分离方法，其特征在于，所述步骤（8）中浓缩液冷冻结晶，冷冻温度为-15 — -10℃，结晶时长18-24h；二次重蒸丙酮水的配比为4：1（丙酮：水）。