[发明专利]用于同步检测华法林代谢基因多态性的方法在审
| 申请号： | 201911290672.X | 申请日： | 2019-12-16 |
| 公开（公告）号： | CN110872611A | 公开（公告）日： | 2020-03-10 |
| 发明（设计）人： | 赵方圆;解娜;智慧芳;倪君君 | 申请（专利权）人： | 西安和合医学检验所有限公司 |
| 主分类号： | C12Q1/6858 | 分类号： | C12Q1/6858;C12N15/11 |
| 代理公司： | 北京双收知识产权代理有限公司 11241 | 代理人： | 解政文 |
| 地址： | 710100 陕西省西安市国家民用航天产*** | 国省代码： | 陕西;61 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 用于 同步 检测 华法林 代谢 基因 多态性 方法 | ||
1.一种用于同步检测华法林代谢基因多态性的引物组，其特征在于，所述引物组包含下述3对引物对中的至少两对：第一组引物对的上游引物的核苷酸序列由SEQ ID NO.1所示，下游引物的核苷酸序列由SEQ ID NO.2所示；第二组引物对的上游引物的核苷酸序列由SEQ ID NO.3所示，下游引物的核苷酸序列由SEQ ID NO.4所示；第三组引物对的上游引物的核苷酸序列由SEQ ID NO.5所示，下游引物的核苷酸序列由SEQ ID NO.6所示。
2.根据权利要求1所述的引物组，其特征在于，所述第一组引物对是用于检测CYP2C9基因的CYP2C9*2(c.430C＞T，rs1799853)位点的引物对；第二组引物对是用于检测CYP2C9基因的CYP2C9*3(c.1075A＞C，rs1057910)位点的引物对；第三组引物对是用于检测VKORC1基因的c.1639G＞A(rs9923231)位点的引物对。
3.权利要求1或2所述的引物组在制备用于同步检测华法林代谢基因多态性的试剂盒中的应用。
4.一种用于同步检测华法林代谢基因多态性的试剂盒，其特征在于，包含权利要求1或2所述的引物组。
5.根据权利要求4所述的试剂盒，其特征在于，还包含DNA聚合酶、PCR缓冲液、4种dNTP的混合物和超纯水。
6.根据权利要求5所述的试剂盒，其特征在于，所述DNA聚合酶的用量为0.5-5U，每种dNTP的终浓度均为50-500μM，引物的终浓度为20-300nM。
7.根据权利要求4-6任一项所述的试剂盒，其特征在于，还包含待测样品DNA提取试剂或DNA提取试剂盒。
8.一种用于同步检测华法林代谢基因多态性的检测方法，其特征在于，采用权利要求1或2所述的引物组对待测样品进行多重PCR检测。
9.根据权利要求8所述的检测方法，其特征在于，包括步骤：
(1)从待测样品中提取基因组DNA，作为扩增模板；
(2)配制包含所述引物组和所述扩增模板的多重PCR反应体系；
(3)对所述多重PCR反应体系进行多重PCR扩增反应，得到PCR产物；
(4)根据所述PCR产物，测定华法林代谢基因多态性。
10.根据权利要求9所述的检测方法，其特征在于，所述PCR扩增反应的反应条件为：91～95℃：1～10min；93～98℃：5～60s，54～68℃：20～60s，68～72℃：1～10min，共25～40个循环；68～72℃：0～30min。
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