[发明专利]琥珀酸亚铁中杂质丁二酸的分离方法

说明书

本发明涉及一种琥珀酸亚铁中杂质丁二酸的分离方法，该方法为采用高效液相色谱法，使用C18或C8色谱柱，用磷酸盐缓冲液、甲醇的混合液为流动相对供试品进行洗脱，该方法还包括供试品的配制方法，使用非质子溶剂提取琥珀酸亚铁中的丁二酸，挥干后用酸性水溶液作为稀释剂配制。使用该方法检测琥珀酸亚铁中的丁二酸快速、灵敏、准确率、精密度高，解决了使用现有技术检测结果虚高的问题。

技术领域

本发明属于医药分析领域，特别涉及一种琥珀酸亚铁中杂质丁二酸的检测方法。

背景技术

琥珀酸亚铁（Ferrous Succinate）主要成分为琥珀酸亚铁，主要用于缺铁性贫血的预防和治疗。琥珀酸亚铁铁元素含量高，接近硫酸亚铁的2倍，琥珀酸还能增高Fe²⁺的吸收率，所以铁的生物利用度高。琥珀酸亚铁片在胃肠道内释放较缓慢，对胃肠道刺激性小，副作用少而轻，是指南推荐口服铁剂一线用药。

丁二酸有名琥珀酸，琥珀酸亚铁的合成过程中会用到六水合丁二酸二钠，多余的六水合丁二酸二钠在水中会转化为丁二酸，是琥珀酸亚铁中的一个杂质。同时，琥珀酸亚铁在水存在的状态下也会少量水解产生丁二酸，因而在制备琥珀酸亚铁片的过程中，也有可能降解产生丁二酸。

所以需在琥珀酸亚铁原料药中检测丁二酸，考察该杂质在琥珀酸亚铁中的残留量。同时需在琥珀酸亚铁片中检测丁二酸，考察制剂工艺是否会降解产生丁二酸及监控丁二酸的水平。

琥珀酸亚铁在水或乙醇中几乎不溶，在稀盐酸中溶解，解离成琥珀酸根离子和亚铁离子。当采用液相色谱法测定丁二酸时，如存在丁二酸根离子，也会被检出，导致无法准确定量杂质丁二酸的含量，所以如何只检测到琥珀酸亚铁及制剂中本身存在的丁二酸，而非琥珀酸亚铁在检测过程中自行游离产生的丁二酸，而造成检测结果虚高的问题，是一个难题。

目前暂未见到有琥珀酸亚铁及制剂中丁二酸检测的报道。

专利CN109580821A报道了一种S-苄基琥珀酸中杂质丁二酸的检测方法，该方法采用高效液相色谱法，色谱柱为氰基柱，甲醇与0.1%磷酸水溶液为流动相进行梯度洗脱。该方法无法解决琥珀酸亚铁中丁二醇虚高的问题。

美国药典USP（40）和文献“HPLC法测定九节菖蒲中琥珀酸含量”中有关于丁二酸的检测方法， 参照USP（40）方法检测琥珀酸亚铁片中丁二酸，发现空白/样品处理过程中容易引入杂质峰干扰丁二酸的检测，尤其在琥珀酸亚铁供试品图谱中干扰严重，杂质峰与丁二酸达不到基线分离，丁二酸保留时间为6.249min，见附图3。参照文献方法，采用色谱柱C18（4.6*250mm，5μm）、流速为0.6ml/min、柱温为25℃，进行空白、丁二酸对照品和供试品检测，结果显示由空白/样品处理过程中偶尔引入的杂质峰与琥珀酸能达到基线分离，但是两个峰仍紧紧相邻，丁二酸峰保留时间为9.208min，见附图4。

因此研究出合适的方法能准确的检测和分离出琥珀酸亚铁中的丁二酸对琥珀酸亚铁的药品质量控制非常重要。

发明内容

本发明的目的在于提供一种检测和分离琥珀酸亚铁中的杂质丁二酸方法，该方法能对准确的检索琥珀酸亚铁中杂质丁二酸的含量，并能有效、快速的分离。

本发明的技术方案是：采用高效液相色谱法分离琥珀酸亚铁中杂质丁二酸，色谱柱为C18或C8色谱柱，用磷酸盐缓冲液、甲醇的混合液为流动相对供试品进行洗脱。

色谱条件如下表：

进一步，本发明还包括供试品的配制方法：

使用非质子溶剂提取琥珀酸亚铁中的丁二酸，挥干后，用酸性水溶液或水作为稀释剂配制供试品；

其中非质子溶剂为甲醇、乙醇、异丙醇、乙腈和丙酮中的一种或几种，优选甲醇；