[发明专利]一种外泌体及其制备方法及应用有效
申请号: | 201911292472.8 | 申请日: | 2019-12-12 |
公开(公告)号: | CN113061579B | 公开(公告)日: | 2023-04-18 |
发明(设计)人: | 邓志婷;郑海荣;严飞;肖杨;李飞 | 申请(专利权)人: | 中国科学院深圳先进技术研究院 |
主分类号: | C12N5/079 | 分类号: | C12N5/079;C12N13/00;A61K35/30;A61P25/28 |
代理公司: | 深圳市科进知识产权代理事务所(普通合伙) 44316 | 代理人: | 曹卫良 |
地址: | 518055 广东省深圳*** | 国省代码: | 广东;44 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 外泌体 及其 制备 方法 应用 | ||
1.一种外泌体的制备方法,其特征在于,包括以下步骤:
将人星型胶质细胞置于培养基中培养;
利用超声装置对人星型胶质细胞进行循环刺激;
将经超声循环刺激后的人星型胶质细胞继续培养后收集细胞培养上清,对细胞培养上清离心处理得到外泌体;
所述循环刺激条件为:超声装置的探头频率为0.5-5MHz,幅值为000-50mV,脉冲重复频率为50-1000Hz,工作周期为10%-70%,超声装置的功率放大器放大5%-45%,循环20-200k次,脉冲间隔为2μs-2s,超声时间为1分钟-10分钟;
所述培养基为不含外泌体的高糖DMEM;
将经超声循环刺激后的人星型胶质细胞继续培养24-72小时后收集细胞培养上清,对所述细胞培养上清进行一系列离心处理,400g,离心15分钟,2000g,离心30分钟,10000g离心60分钟,100000g离心90分钟,获得的沉淀即为外泌体。
2.根据权利要求1所述的外泌体的制备方法,其特征在于,所述外泌体的平均直径为50nm~150nm。
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