[发明专利]铁皮石斛叶中的一种联苄类衍生物及其制备方法和用途

说明书

铁皮石斛是一种珍稀药用植物，其药用部位为茎，其叶作为农业副产品直接丢弃，造成了一定的生物资源浪费。本发明涉及一种从铁皮石斛叶中提取的联苄类化合物，以及它的制备方法和在制备治疗炎症性疾病药物中的应用。所述的联苄类化合物为一个新化合物，命名为denofficin，具有下述结构：。活性测试结果表明，denofficin对大鼠中性粒细胞呼吸爆发具有强烈的抑制活性，其半数抑制浓度分别为0.22±0.09μM，可进一步用于制备治疗炎症性疾病药物。本发明为综合利用生产铁皮石斛过程的废弃生物资源制备治疗炎症性疾病药物提供了理论基础。

技术领域

本发明属于医药领域，具体涉及铁皮石斛叶中的一种联苄类化合物及其制备方法和在制备治疗炎症性疾病药物中的应用。

背景技术

中性粒细胞 (PMNs) 呼吸爆发是指活化的中性粒细胞消耗大量的氧产生活性氧(ROS) 的过程。ROS具有很高的反应性，可以与细胞膜、核酸分子及蛋白质发生氧化还原反应,造成生物细胞损伤和死亡。因此，当外来病原菌入侵时，PMNs作为宿主防御外来病原体入侵的第一道防线被激活，然后通过呼吸爆发释放ROS而发挥杀菌功能。但PMNs 的激活是一把双刃剑，正常时能消灭外源性病原体、清除坏死组织、促进伤口愈合，是机体的“保护者”。但在某些病理条件下 (如严重创伤、烧伤、休克、缺血再灌注等)，PMNs 过度激活却可阻塞微循环、损伤血管内皮细胞和血管外组织细胞、释放和促进释放炎症介质，成为“破坏者”，是导致全身炎症反应综合征、多器官功能衰竭的重要原因。目前渥曼青霉素(wortmannin)、一些大环内酯类抗生素及非甾体抗炎药等抗生素类药物在临床上被用于一般性炎症疾病的治疗。然而，因PMNs 呼吸爆发所引起的失控性炎性反应与细菌等病原体感染无关，经常导致抗生素治疗无效。因此，发现抑制PMNs呼吸爆发的药物用于控制PMNs呼吸爆发所致的严重炎症反应具有重要意义。

从天然药物中分离鉴定结构新颖、活性显著的天然产物一直是新药发现的主要途径之一。铁皮石斛 (Dendrobium officinale) 为兰科石斛属珍稀药用植物，作为中药品种铁皮石斛的基原植物收载于2010年版《中国药典》，具有“益胃生津，滋阴清热”的功效，被广泛地用作健康食品及补品。在民间，铁皮石斛有“仙草”的美誉，因为过度采挖，野生铁皮石斛资源已濒临枯竭，目前主要以人工栽培来满足市场需求。铁皮石斛的药用部位为其茎，因此在采收时，大量的叶子都作为农业副产品直接丢弃，造成了一定的生物资源浪费。为了综合开发铁皮石斛植物资源，本发明对其叶进行了化学成分研究，并评价了所得单体对PMNs呼吸爆发的抑制活性。

发明内容

本发明的目的是提供具有抑制PMNs呼吸爆发活性的物质，为临床上与PMNs呼吸爆发相关炎症的治疗提供药物。具体涉及铁皮石斛叶中提取的一种联苄类化合物，具有如下所示的化学结构：

。

该化合物是未见文献报道的新化合物，命名为denofficin。

本发明的进一步目的是提供上述化合物在制备抗炎 (与PMNs呼吸爆发相关炎症)药物中的新用途。

本发明所述化合物通过下述方法制备：

a.用体积浓度为50-100%的乙醇对铁皮石斛叶在室温下浸提，浸提使用的药材与溶剂为1:5-1:10，其中药材以千克计，溶剂以升计；重复浸提2-3次，每次10-20天；合并浸提液，减压浓缩，得到浸膏；

b.将步骤 a 得到的浸膏加入10%-20%乙醇分散，其加入的比例为浸膏：蒸馏水为1:2-1:5，其中浸膏以千克计，蒸馏水以升计，得分散液；

c.将步骤 b 得到的分散液上大孔吸附树脂柱, 依次用蒸馏水、10%乙醇、20%乙醇、30%乙醇、40%乙醇、50%乙醇、60%乙醇、70%乙醇、80%乙醇、90%乙醇梯度洗脱，每梯度洗脱5个柱体积，得到10个流分frs. H0-H9；