[发明专利]用于降低CHO细胞中表达重组蛋白的氧化的液体培养基在审
| 申请号： | 201911298880.4 | 申请日： | 2019-12-17 |
| 公开（公告）号： | CN112980796A | 公开（公告）日： | 2021-06-18 |
| 发明（设计）人： | 黄根树;李得林;高相雷;郭林峰;李晓平;李文佳;陈小锋;廖超;孟晓;龚庆伟;张晓焰;宁荣良 | 申请（专利权）人： | 东莞市东阳光生物药研发有限公司 |
| 主分类号： | C12N5/10 | 分类号： | C12N5/10;C12P21/02;C12P21/08;C07K19/00;C07K16/44 |
| 代理公司： | 暂无信息 | 代理人： | 暂无信息 |
| 地址： | 523871 广东省东莞市*** | 国省代码： | 广东;44 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 用于 降低 cho 细胞 表达 重组 蛋白 氧化 液体 培养基 | ||
1.一种用于降低CHO细胞中表达重组蛋白的氧化的液体培养基，其特征在于，包括培养基添加物，所述培养添加物为米诺地尔，所述液体培养基能够降低蛋白合成中氧化杂质的形成。
2.根据权利要求1所述的液体培养基，其特征在于，还包括基础培养基和补料培养基；所述基础培养基为Dynamis或EXCELL Advanced CHO medium；所述补料培养基为CellBoost或EXCELL Advanced Feed1。
3.根据权利要求1所述的液体培养基，其特征在于，将所述米诺地尔配成母液，在细胞接种0-10天内一次性添加或在培养过程中分阶段多次添加。
4.根据权利要求1或3任一项所述的液体培养基，其特征在于，所述米诺地尔的浓度为0.1-1mM；任选的，所述米诺地尔的浓度为0.6mM；任选的，所述米诺地尔的浓度为0.3mM，任选的，所述米诺地尔的浓度为0.9mM。
5.一种CHO细胞的培养方法，其特征在于，利用权利要求1-4任一项所述的液体培养基对CHO细胞进行培养。
6.根据权利要求5所述的方法，其特征在于，利用所述培养基对CHO细胞进行培养，以便获得氧化杂质少的融合蛋白或单抗，所述培养的培养工艺为分批培养、补料分批培养或灌流培养；所述培养的培养容器为三角瓶、搅拌式反应器或波浪式反应器；所述培养的培养温度为30-37℃。
7.根据权利要求5-6任一项所述的方法，其特征在于，进行所述培养之前，进一步包括将CHO细胞接种于所述基础培养基；所述接种量为0.2～1.2*106个/mL。
8.根据权利要求6所述的方法，其特征在于，所述融合蛋白为Fc融合蛋白；优选的，所述融合蛋白为GLP-1的Fc融合蛋白；所述单抗为阿达木单抗。
9.权利要求1-4任一项所述的培养基或权利要求5-8任一项所述的培养方法在降低融合蛋白及抗体类药物氧化杂质上的应用。
10.一种用于降低CHO细胞中表达重组蛋白的氧化的方法，其特征在于，在细胞培养过程中添加米诺地尔，或者利用权利要求1-4任一项所述的培养基或权利要求5-8任一项所述的培养方法培养CHO细胞。
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