[发明专利]一种生产霉酚酸的发酵培养基及发酵方法在审
申请号: | 201911299783.7 | 申请日: | 2019-12-17 |
公开(公告)号: | CN112980902A | 公开(公告)日: | 2021-06-18 |
发明(设计)人: | 平丽英;安方正;方丽纳;匡春兰;胡坚;张薇 | 申请(专利权)人: | 杭州中美华东制药有限公司 |
主分类号: | C12P17/04 | 分类号: | C12P17/04;C12N1/14;C12R1/80 |
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地址: | 310011 浙江*** | 国省代码: | 浙江;33 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 生产 霉酚酸 发酵 培养基 方法 | ||
1.一种生产霉酚酸的发酵培养基,所述发酵培养基包含甲硫氨酸、碳源和氮源,其特征在于所述氮源不包含复合有机氮源。
2.根据权利要求1所述的发酵培养基,其特征在于所述发酵培养基以氨基酸为氮源;进一步优选的,所述氮源为氨基乙酸。
3.根据权利要求2所述的发酵培养基,其特征在于所述发酵培养基包含甲硫氨酸和氨基乙酸的组合;进一步优选的,所述发酵培养基中包含甲硫氨酸1.0-2.0g/L,氨基乙酸10-25g/L;最为优选的,所述甲硫氨酸1.0-1.5g/L,氨基乙酸12.6-15g/L。
4.根据权利要求3所述的发酵培养基,其特征在于所述发酵培养基包含以下成分:葡萄糖200-250g/L,氨基乙酸10-25g/L,磷酸二氢钾6-10g/L,甲硫氨酸1.0-2.0g/L,微量元素1g/L,泡敌0.3g/L,发酵PH4.5。
5.根据权利要求1-4任一所述的发酵培养基,其特征在于生产霉酚酸的菌株为短密青霉菌广西变种YMS-110。
6.一种发酵短密青霉菌生产霉酚酸的方法,其特征在于所述发酵方法包含种子培养阶段和发酵培养阶段。
7.根据权利要求6所述的发酵方法,其特征在于所述种子培养阶段包含如下步骤:
取短密青霉菌孢悬液斜面培养8-10天,然后无菌水制备成菌悬液,接着按10%接孢量接种至装有种子培养基的摇瓶中,24℃、250rpm振荡培养27-30h,得到摇瓶种子培养液;
将所述的摇瓶种子培养液,按照0.1%-0.2%的接种量接到装有种子罐培养基的种子罐中进行培养,培养温度为24±1℃,空气流量为1:1-1:2,罐压0.05-0.07Mpa,培养时间为40-42h,得种子罐培养液。
8.根据权利要求6或7所述的发酵方法,其特征在于所述发酵培养阶段包含如下步骤:将所述种子罐培养液按10%的接种量接种至发酵摇瓶中进行发酵培养,培养温度为24±1℃,溶氧大于25%,发酵周期为8-10天。
9.根据权利要求6-8任意一项所述的发酵方法,其特征在于所述的发酵方法还包含补料培养,所述的补料培养为在发酵培养开始的第5天开始向发酵培养基中加入补料培养基继续培养。
10.根据权利要求9所述的发酵方法,其特征在于所述补料培养基中包含甲硫氨酸、碳源和氮源;优选的,所述发酵培养基和补料培养基中的甲硫氨酸的浓度之和为1.0-2.0g/L;进一步优选的,所述发酵培养基和补料培养基中的甲硫氨酸的浓度之和为1.5g/L。
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