[发明专利]一种快速检测食品中重金属铅的荧光免疫层析试纸

权利要求书

1.一种快速检测食品中重金属铅的荧光免疫层析试纸，包括底板(1)，其特征在于，所述底板(1)上依次并相互交错粘贴有样品垫(2)、结合垫(3)、包被膜(4)和吸水纸(7)，所述包被膜(4)一端的上端面与结合垫(3)的一端贴合，包被膜(4)的另一端的上端面与吸水纸(7)的一端贴合，包被膜(4)上包被有检测线(5)和质控线(6)，结合垫(3)另一端的上端面与样品垫(2)的一端贴合，检测线(5)和质控线(6)相互不交叉，所述结合垫(3)上包被有荧光微球标记的铅特异性抗体，所述检测线(5)由铅离子完全抗原构成，所述质控线(6)由羊抗鼠IgG构成。

2.如权利要求1所述的快速检测食品中重金属铅的荧光免疫层析试纸，其特征在于，所述样品垫(2)为玻璃纤维棉，所述结合垫(3)为聚酯纤维膜，所述包被膜(4)为硝酸纤维素膜。

3.如权利要求2所述的快速检测食品中重金属铅的荧光免疫层析试纸，其特征在于，所述检测线(5)和质控线(6)相互平行且留有间距，所述检测线(5)靠近结合垫(3)，所述质控线(6)靠近吸水纸(7)。

4.如权利要求1－3之一所述的快速检测食品中重金属铅的荧光免疫层析试纸，其特征在于，所述铅特异性抗体为鼠源性单克隆抗体，所述荧光微球为直径为100－300nm的稀土铕离子螯合物掺杂的微球，微球表面带有活性基团羧基。

5.如权利要求4所述的快速检测食品中重金属铅的荧光免疫层析试纸，其特征在于，所述铅离子完全抗原为铅离子、螯合剂以及载体蛋白形成的偶合物。

6.如权利要求5所述的快速检测食品中重金属铅的荧光免疫层析试纸，其特征在于，所述螯合剂为乙二胺四乙酸，载体蛋白为牛血清蛋白。

7.如权利要求6所述的快速检测食品中重金属铅的荧光免疫层析试纸，其特征在于，结合垫(3)上的荧光微球标记的铅特异性抗体喷涂层的形成方法包括以下步骤：

步骤1、将设计量的铕离子螯合物荧光微球加入到预先配比好的硼酸缓冲溶液中，然后超声分散；

步骤2、步骤1完成后，向溶液中加入设计量的碳二亚胺和N－羟基琥珀酰亚胺，振荡反应后进行离心洗涤，然后分散于硼酸缓冲溶液中；

步骤3、步骤2完成后，向溶液中加入设计量的铅离子抗体溶液，振荡反应8h以上；

步骤4、对步骤3得到的溶液进行离心分离，然后用含牛血清蛋白的硼酸缓冲溶液封闭保存1－3h，然后再离心洗涤后置于硼酸缓冲溶液中于3－6℃下保存，得到储存液；

步骤5、将储存液按体积比1：(90－100)的比例稀释于含牛血清蛋白、Tween－20、聚乙烯吡咯烷酮、海藻糖、叠氮化钠的硼酸缓冲溶液中，使用定量喷膜仪喷涂于结合垫(3)上，在30－40℃下鼓风烘干，然后在3－6℃下避光干燥即得。

8.如权利要求7所述的快速检测食品中重金属铅的荧光免疫层析试纸，其特征在于，在步骤5中，所述硼酸缓冲溶液中，含有质量浓度为0.4－0.6％的牛血清蛋白、体积分数为2－3％的Tween－20、质量浓度为0.4－0.6％的聚乙烯吡咯烷酮、质量浓度为1－3％的海藻糖和质量浓度为0.01－0.03％的叠氮化钠，该硼酸缓冲溶液的pH值为8.0－8.5。