[发明专利]酶活性的检测方法、检测装置

说明书

本申请提供了一种酶活性的检测方法、检测装置，可以通过酶催化碱基进行聚合反应过程中产生的副产物，检测酶的活性。该方法不仅操作简单灵敏、检测成本较低，而且可以提高检测速度、实现高通量筛选。该检测方法可以包括：使用酶将碱基与第一基因片段进行聚合，获得第二基因片段和副产物；根据该副产物来检测酶的活性。

技术领域

本申请涉及生物技术领域，并且更具体地，涉及酶活性的检测方法、检测装置。

背景技术

脱氧核糖核酸(deoxyribonucleic acid，DNA)合成技术已成为分子生物学研究必不可少的手段。常用的一种DNA合成的方法是酶法合成。在酶法合成时，在酶的催化作用下，碱基与基因片段进行合成。不同活性的酶，催化效果不同。因此，酶法合成时，需要检测酶的活性。那么，如何检测酶的活性成为当前亟需要解决的问题。

发明内容

本申请提供一种酶活性的检测方法、检测装置，可以通过酶催化碱基与基因片段进行聚合反应过程中产生的副产物，确定酶的活性，该方法操作简单灵敏，检测速度快，检测成本较低。

第一方面，提供了一种酶活性的检测方法，该方法可以包括：使用酶将碱基与第一基因片段进行聚合，获得第二基因片段和副产物；根据该副产物检测酶的活性。

上述技术方案中，使用酶对碱基进行聚合时，如使用酶将碱基与第一基因片段进行聚合，可以通过聚合反应过程中产生的副产物，来检测酶的活性。这种通过副产物来检测酶活性的方法，不仅操作简单灵敏，而且检测成本较低。

此外，通过检测聚合反应过程中产生的副产物来确定酶的活性，而不需要以检测聚合后获得的第二基因片段是否成功添加一个碱基的方式来检测酶的活性。因此，本发明实施例提供的通过检测聚合反应过程中产生的副产物来确定酶的活性的检测方法，与检测聚合后获得的基因片段的检测方法相比，可以提高检测速度。在某些场景下，如需要成批次筛选酶的场景下，在同样的条件下，如同样的时间内，通过检测聚合反应过程中产生的副产物来确定酶的活性，与检测聚合后获得的基因片段相比，可以提高筛选的速度、增加筛选的通量，从而可以实现高通量筛选。

因此，通过本申请提供的酶活性的检测方法，不仅操作简单灵敏、检测成本较低，而且可以提高检测速度、实现高通量筛选。

在一种可能的实现方式中，该酶为末端核苷酸转移酶，该碱基为修饰碱基，该化合物为焦磷酸分子PPi。

示例地，该碱基为终端修饰碱基。

上述技术方案中，通过检测末端核苷酸转移酶对修饰碱基聚合反应过程中的PPi，来检测末端核苷酸转移酶的活性，如末端核苷酸转移酶聚合修饰碱基的能力，从而可以根据需求筛选出满足需求的末端核苷酸转移酶。可以实现对末端核苷酸转移酶聚合终端修饰碱基活性的快速、高通量筛选，使得大批量筛选末端核苷酸转移酶成为可能，并且该活性检测方法对反应底物的用量需求少，可降低检测成本。

在另一种可能的实现方式中，根据副产物检测酶的活性，包括：通过检测PPi的荧光值来检测该末端核苷酸转移酶的活性。

上述技术方案中，通过检测PPi的荧光值来检测该末端核苷酸转移酶的活性，不仅方便、可操作性强，而且可以进一步提高检测速度。

在另一种可能的实现方式中，修饰碱基与第一基因片段的比值大于或等于10000:1。

例如，修饰碱基与第一基因片段(寡核苷酸)的比值可以为10000:1。

上述技术方案中，可以预先通过调整修饰碱基与第一基因片段的比值，来确定修饰碱基与第一基因片段的比值满足某一条件时，酶的催化效率较好。进而可以将修饰碱基与第一基因片段的比值设定在某一范围内，从而可以提高检测的效率。