[发明专利]用于活菌制剂中的杂菌检测的培养基

说明书

本发明提出了一种培养基，所述培养基用于活菌制剂中的杂菌检测，所述培养基包括无乳糖培养基质和脱氧胆酸钠或其立体异构体、互变异构体，所述无乳糖培养基质包括蛋白胨、氯化钠、牛肉浸出粉。根据本发明实施例的培养基可有效用于活菌制剂中的杂菌的检测，克服了现有技术中活菌制剂菌(如蜡样芽孢杆菌)的干扰，造成假阴性问题，提高了活菌制剂中杂菌检测的准确性，提高了含芽孢类菌微生态制剂的安全性。

技术领域

本发明涉及生物医药检测领域，具体地，本发明涉及用于活菌制剂中的杂菌检测的培养基，更具体地，本发明涉及脱氧胆酸钠和无乳糖培养基质在制备培养基中的用途、用于活菌制剂中的杂菌检测的培养基以及活菌制剂中的杂菌进行检测的方法。

背景技术

在活菌制剂的制备过程中，由于原辅料包材中有时会含有及其微量的或者在活菌制剂的制备过程会引入微量的杂菌，如芽孢菌，其代表菌株为枯草芽孢杆菌，革兰氏阳性球菌，其代表菌株为金黄色葡萄球菌。出于药品安全的考虑，该杂菌的含量必须严格控制在安全范围内，才可上市。

目前市售含有芽孢类的产品如：思连康的双歧杆菌四联活菌片、整肠生的地衣芽孢杆菌活菌胶囊和地衣芽孢杆菌活菌颗粒、京常乐的地衣芽孢杆菌活菌胶囊、天悦婷的枯草杆菌活菌胶囊、美常安的枯草杆菌二联活菌肠溶胶囊、妈咪爱的枯草杆菌、肠球菌二联活菌多维颗粒剂、源首的蜡样芽孢杆菌活菌胶囊、常复康的蜡样芽孢杆菌片、阿泰宁的酪酸梭菌活菌胶囊、常立宁的酪酸梭菌活菌片、宝乐安的酪酸梭菌活菌散、米桑的酪酸梭菌活菌胶囊、常乐康的酪酸梭菌二联活菌散和酪酸梭菌二联活菌胶囊、爽舒宝的凝结芽孢杆菌活菌片以及米雅的酪酸梭菌活菌散剂和酪酸梭菌活菌片。

而现有的活菌制剂的药典规定的杂菌的检测方法中采用的培养基无法排除含有芽孢类菌微生态制剂中芽孢杆菌对检测的干扰。因此，如果采用现有的方法检测活菌制剂的杂菌的含量，不可避免的会产生假阴性的检测结果，对药品的安全存在极大隐患；同时，活菌制剂如果含有芽孢杆菌，采用现有的方法检测活菌制剂的杂菌的含量时，芽孢杆菌会在营养琼脂培养基上生长蔓延严重，干扰杂菌辨别，故无法用现有方法进行杂菌检测，因此需要寻找一种能够抑制目标菌的物质，达到抑制微生态制剂中芽孢类菌生长，但不干扰杂菌的生长。

因此，开发一种新型的可用于活菌制剂的杂菌有效检测的培养基和方法，是保证活菌制剂用药安全的必要举措。

发明内容

本申请的发明人基于对现有抑菌剂和检测活菌制剂的杂菌培养基成分的认识，通过抑菌剂的筛选实验，并有目地逐步降低现有培养基中的抑菌剂(伊红Y和美蓝)的含量，又或者替换为所筛选出的抑菌剂，通过考察杂菌在培养基中的回收率以及培养基对该杂菌生长的影响，确定了一种可同时应用于活菌剂中金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌、大肠埃希菌、铜绿假单胞菌和白色念珠菌含量检测的培养基和方法，克服了现有技术中活菌制剂的杂菌检测的假阴性问题和蜡样芽孢杆菌会在营养琼脂培养基上生长蔓延而干扰杂菌辨别的问题，提高了活菌制剂的用药安全性。

在本发明的第一方面，本发明提出了一种培养基，所述培养基用于活菌制剂中的杂菌检测。根据本发明的实施例，所述培养基包括无乳糖培养基质和脱氧胆酸钠或其立体异构体、互变异构体，所述无乳糖培养基质包括蛋白胨、氯化钠和牛肉浸出粉。发明人发现，无乳糖培养基质可降低大肠杆菌利用乳糖代谢所产生的代谢产物对检测所产生的干扰，同时，无乳糖培养基质不利于活菌制剂中活性成分菌的生长，可进一步降低活菌制剂中的活性成分菌对杂菌检测的干扰。根据本发明实施例培养基一方面通过无乳糖培养基质克服了活菌制剂中活性成分菌对杂菌检测的干扰，另一方面脱氧胆酸钠或其立体异构体、互变异构体作为抑菌剂替代原有的伊红Y和美蓝对活菌制剂中的活性成分菌进一步抑制而对活菌制剂中杂菌抑制作用微小，使得活菌制剂中的杂菌可在该培养基中选择性生长和扩增。根据本发明实施例的培养基可有效用于活菌制剂中的杂菌的计数，克服了现有技术中活菌制剂的杂菌检测的假阴性问题，提高了活菌制剂的用药安全性。

根据本发明的实施例，上述培养基还可以进一步包括如下附加技术特征至少之一：