[发明专利]一种曲霉菌的化学发光检测试剂盒及其应用

权利要求书

1.一种曲霉菌的化学发光检测试剂盒，其特征在于，所述试剂盒包括捕获抗体和信号抗体，所述捕获抗体和所述信号抗体为抗曲霉菌半乳甘露聚糖的单克隆抗体，所述单克隆抗体的重链可变区为如SEQ ID NO: 1所示的氨基酸序列；

所述单克隆抗体的轻链可变区为如SEQ ID NO: 2所示的氨基酸序列。

2.根据权利要求1所述的试剂盒，其特征在于，所述捕获抗体上修饰有生物素或荧光基团；

所述荧光基团包括FITC、ALEX-350、Alexa Fluor 488、Cy3、Cy5、FAM、VIC、TET、JOE、HEX或ROX中的任意一种或至少两种的组合；

所述捕获抗体的浓度为0.5~3 μg/mL。

3.根据权利要求2所述的试剂盒，其特征在于，所述荧光基团为FITC。

4.根据权利要求1-3中任一项所述的试剂盒，其特征在于，所述信号抗体上修饰有化学发光基团；

所述化学发光基团包括吖啶酯、鲁米诺、(金钢烷)-1,2-二氧乙烷或碱性磷酸酶中的任意一种或至少两种的组合；

所述信号抗体的浓度为0.5~3 μg/mL。

5.根据权利要求4所述的试剂盒，其特征在于，所述化学发光基团为吖啶酯。

6.根据权利要求1-3或权利要求5中任一项所述的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒还包括固相载体；

所述固相载体包括磁微粒、酶标板、微球、亲和膜或液相芯片中的任意一种或至少两种的组合；

所述固相载体表面修饰有链霉亲和素和/或荧光基团的特异性抗体。

7.根据权利要求6所述的试剂盒，其特征在于，所述固相载体为磁微粒；

所述磁微粒的浓度为100~1000 μg/mL。

8.根据权利要求7所述的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒还包括校准品，所述校准品为曲霉菌半乳甘露聚糖；

所述校准品的浓度分别为0.2~25.0 ng/mL。

9.一种半乳甘露聚糖的检测方法，其特征在于，所述检测方法采用如权利要求1-8任一项所述的试剂盒。

10.根据权利要求9所述的检测方法，其特征在于，所述检测方法包括抗原结合的步骤；

所述抗原结合的步骤包括（a）~（c）中的任意一种；

（a）将生物素标记捕获抗体和链霉亲和素标记固相载体共孵育，加入待测样本和信号抗体，混合孵育后去上清；

（b）将待测样本采用链霉亲和素标记固相载体进行预处理，去除待测样本中的生物素；加入生物素标记捕获抗体、链霉亲和素标记固相载体和信号抗体，混合孵育后去上清；

（c）向待测样本中加入FITC标记捕获抗体、信号抗体、FITC抗体标记固相载体，混合孵育后去上清。

11.根据权利要求9或10所述的检测方法，其特征在于，（a）中所述共孵育的时间为1~10min，所述混合孵育的时间为1~10 min；

（b）中所述预处理的时间为1~10 min，所述混合孵育的时间为1~20 min；

（c）中所述混合孵育的时间为1~20 min。

12.根据权利要求11所述的检测方法，其特征在于，所述检测方法在抗原结合后还包括化学发光检测的步骤；

所述化学发光检测包括加入底物，测定化学发光强度；根据标准曲线，计算得到所述待测样本中曲霉菌半乳甘露聚糖的浓度。

13.一种如权利要求1-8任一项所述的试剂盒在制备曲霉菌感染疾病检测试剂中的应用。