[发明专利]一种荷花玉兰醇B的制备方法

说明书

本发明公开了一种荷花玉兰醇B的制备方法，以荷花玉兰叶为原料，包括大孔吸附树脂富集和HSCCC纯化两步，其中：大孔吸附树脂型号是ADS‑17，HSCCC溶剂体系是体积比为5:11:6:7的正己烷‑乙酸乙酯‑甲醇‑水体系，上相作为固定相，下相作为流动相。本发明提供的方法无需多次柱色谱层析，仅需过一次大孔树脂富集，加上一次HSCCC纯化，即可得到高纯度荷花玉兰醇B，步骤精简。

技术领域

本发明涉及化学领域，具体涉及一种荷花玉兰醇B的制备方法。

背景技术

荷花玉兰醇B是从荷花玉兰中分离纯化得到的一种天然化合物，化学结构如下。

活性研究结果显示荷花玉兰醇B具有多种活性，尤其是治疗膝骨关节炎，但是传统分离纯化荷花玉兰醇B的方法需要多次柱色谱层析，步骤繁琐。

发明内容

本发明的目的是为了克服现有技术不足，提供一种荷花玉兰醇B的制备方法。

实现上述目的的技术方案如下：

一种荷花玉兰醇B的制备方法，以荷花玉兰叶为原料，包括大孔吸附树脂富集和HSCCC纯化两步，其中：大孔吸附树脂型号是ADS-17，HSCCC溶剂体系是体积比为5:11:6:7的正己烷-乙酸乙酯-甲醇-水体系，上相作为固定相，下相作为流动相。

进一步地，大孔吸附树脂富集步骤为：将荷花玉兰叶提取物用30％乙醇溶液溶解，上样于大孔吸附树脂柱，先用30％乙醇溶液洗脱，再用50％乙醇溶液洗脱，最后用70％乙醇溶液洗脱，收集其3.5～4.5BV洗脱液，浓缩，冷冻干燥

更进一步地，先用30％乙醇溶液洗脱5BV。

更进一步地，再用50％乙醇溶液洗脱7BV。

进一步地，HSCCC纯化步骤为：以30mL/min的流速将固定相泵入主机中，待出口流出液体后，启动主机正转，调整转速为850r/min，设置检测器波长和柱温，同时开始泵入流动相，待流动相流出主机且检测基线稳定后，分离体系达到平衡；量取含有荷花玉兰叶提取物的进样溶液注入主机，采集数据，根据色谱图收集荷花玉兰醇B色谱峰对应流份，浓缩干燥。

更进一步地，出口流出20～30mL液体启动主机正转。

更进一步地，检测器波长设置为210nm。

更进一步地，柱温设置为25℃。

更进一步地，流动相流速为4mL/min。

有益效果：

本发明提供的方法无需多次柱色谱层析，仅需过一次大孔树脂富集，加上一次HSCCC纯化，即可得到高纯度荷花玉兰醇B，步骤精简。

附图说明

图1为HSCCC色谱图；

图2为荷花玉兰醇B的HPLC色谱图。

具体实施方式

一、材料和仪器

从云南昆明采集晾干制备荷花玉兰Magnolia grandifloraL.的干燥叶，干燥保存备用。

ADS-17型大孔吸附树脂，购自北京索莱宝科技有限公司，按说明书活化、保存。

TBE-300C高速逆流色谱仪(HSCCC)，购自上海同田生物技术股份有限公司。

无水乙醇购自南京化学试剂股份有限公司，纯净水品牌为哇哈哈。

正己烷、乙酸乙酯、甲醇均购自南京化学试剂股份有限公司。

二、方法和结果