[发明专利]同时检测淋病奈瑟菌、沙眼衣原体及解脲脲原体核酸的试剂盒及其应用

说明书

本发明公开了同时检测淋病奈瑟菌、沙眼衣原体及解脲脲原体核酸的试剂盒及其应用。将采集的样本经细胞裂解液裂解后释放病原体核酸，经过逆转录和转录过程，实现病原体核酸片段的扩增。扩增后的RNA产物加入到包被有包被探针的微孔中，同时加入特异探针及放大探针，其中包被探针可与特异探针CES的一端结合固定扩增产物RNA；特异探针LES的一端结合到RNA产物上，另一端与放大探针结合，实现信号放大。本发明无需RNA提取，在检测中不易污染，灵敏度高、特异性强，可广泛用于淋病奈瑟菌、沙眼衣原体及解脲脲原体核酸检测。

技术领域

本发明涉及生物检测技术领域，具体涉及一种基于双扩增(RNA恒温扩增+多生物素信号放大)技术联合检测淋病奈瑟菌、沙眼衣原体及解脲脲原体核酸的试剂盒及其应用。

背景技术

性传播疾病是指主要由性接触而传染的一组传染病，简称为性病。常见的性病病原体有病毒、细菌、支原体、衣原体等。泌尿生殖道感染中，主要是由淋病奈瑟菌、沙眼衣原体和解脲脲原体引起的，三者常呈共同感染状态。

性传播疾病是世界范围内的高发病，发病率呈逐年升高的趋势，感染多发于性活动活跃、不洁性接触、怀孕的人群中，且呈现年轻化的趋势，20～40岁是性传播疾病的高发年龄段。沙眼衣原体感染率可达15.8％，妊娠妇女的沙眼衣原体感染的发病率相对较高，在我国的研究数据表明从10％～13％不等。男性泌尿生殖道解脲脲原体菌群的寄生率约为25％，女性泌尿生殖道解脲脲原体菌群的寄生率约为0-80％。

淋病奈瑟菌是引起是淋病的病原体，为严格的人体寄生菌，常存在于急性尿道炎和阴道炎的脓性分泌物的细胞中，形态染呈卵圆形或豆形，革兰染色阴性。淋球菌感染可引起泌尿生殖系统的化脓性感染，此外还可以引起泌尿生殖道以外的感染，如直肠炎、咽炎、新生儿眼结膜炎等。临床表现以尿道炎、宫颈炎多见，典型症状是排尿困难、尿频、尿急、尿痛、排出黏液或脓性分泌物等。也可侵犯眼睛、咽部、直肠和盆腔等处以及血行播散性感染引起关节炎、肝周炎、败血症、心内膜炎或脑膜炎等。

沙眼衣原体是一类在细胞内寄生的微生物，大小约250～450nm，革兰阴性，圆形或椭圆形；含DNA和RNA以及核糖体；有细胞壁，其结构和组成类似于革兰阴性菌。沙眼衣原体基于抗外膜蛋白单克隆或多克隆抗体的血清分型，将沙眼衣原体分为12个血清型：A-K。其中，A、B/Ba和C型主要引起沙眼；D～K型主要引起泌尿生殖道感染。沙眼衣原体可引起非淋菌性尿道炎和盆腔炎，临床表现出一系列临床症状，如尿道炎、宫颈炎、前列腺炎、性病性淋巴肉芽肿、Reiter综合征等。沙眼衣原体感染后若未经及时治疗，可引起输卵管性不孕、异位妊娠等一系列并发症，而长期反复的生殖道沙眼衣原体感染，可增加宫颈鳞状上皮细胞癌和艾滋病发病的危险。沙眼衣原体感染的母亲还可通过垂直传播引起婴儿眼结膜炎、肺炎等，其感染率可达60％—70％。

解脲脲原体是介于细菌与病毒之间的最小原核生物，根据其表型、遗传和分子生物学特征，可分为14个血清型，而根据其分子特征又可分为两个生物群：生物1群包括1、3、6、14，4个血清型；生物2群为其余10个血清型。致病菌尤以血清型1、3、6、14型为主。解脲脲原体主要寄居于人体的泌尿生殖道，与许多泌尿生殖道感染症、围产期感染和不育症有密切联系。解脲脲原体可引起患者非淋菌性尿道炎、宫颈炎、前列腺炎、不孕不育症等危害，孕妇感染，可危害母体健康、胎儿生存。解脲脲原体可存在于健康无症状的个体中，是一种条件致病微生物，在特定的环境下可以致病，其致病性与多种因素有关，如宿主免疫力、病原血清型或基因型等。