[发明专利]一种鬼针草总黄酮的制备方法、检测方法及在糖尿病防治中的应用

权利要求书

1.一种鬼针草总黄酮的检测方法，其特征在于，包括：

取鬼针草药材于50℃干燥后，切制成0.5 cm小段，称取80 g药材，加入12倍体积浓度为80%乙醇，加热回流提取3次，每次2小时，过滤，合并滤液，减压浓缩后定容至250 mL，得鬼针草总黄酮提取液；

采用AB-8大孔吸附树脂进行鬼针草总黄酮的纯化：用95%乙醇浸泡大孔树脂24小时，去除杂质；使用前，先用乙醇清洗树脂，然后用蒸馏水冲洗，至无醇味，装柱；取20 mL 1.1中得到的鬼针草总黄酮提取液用稀盐酸调节pH为5.0，上样，用蒸馏水洗脱至无色，然后用75%乙醇进行洗脱，洗脱剂用量为100 mL，洗脱速度为3 BV/h；收集乙醇洗脱液，回收乙醇，浓缩，干燥，得鬼针草总黄酮提取物；

将鬼针草总黄酮提取物利用超高效液相色谱-电喷雾-飞行时间质谱联用仪进行检测，得到鬼针草总黄酮提取物的高效液相色谱图与质谱数据；

所述高效液相色谱-电喷雾-飞行时间质谱联用仪采用Agilent1200系列超高效液相色谱系统，二级管阵列检测器进行分析；

所述高效液相色谱-电喷雾-飞行时间质谱联用仪检测中采用Symmetry C18为色谱柱；以0.1%甲酸水溶液为流动相A，乙腈为流动相B；采用梯度洗脱的洗脱方式；以体积百分数计，所述梯度洗脱程序为0~25 min，15%~40%流动相B；25~35 min，20%~50%流动相B；35~50min，55%~80%流动相B；检测波长为254 nm；

所述高效液相色谱-电喷雾-飞行时间质谱联用仪的离子源为电喷雾离子化源，负离子模式，质量扫描范围为100~2000 m/z；毛细管电压为4000 V；破碎器电压130 V；锥孔电压65V；干燥气体流量11 L/min；雾化器温度300℃；喷雾压力30 psig；MS/MS碰撞能量为10~50V。