[发明专利]一种鬼针草总黄酮的制备方法、检测方法及在糖尿病防治中的应用

说明书

本发明提供了一种鬼针草总黄酮的制备方法，包括：S1)将鬼针草与乙醇水溶液混合，加热回流进行提取，得到鬼针草总黄酮提取液；S2)将所述鬼针草总黄酮提取液的pH值调节至弱酸性，然后采用AB‑8大孔吸附树脂进行纯化，得到鬼针草总黄酮提取物。与现有技术相比，本发明将鬼针草用乙醇提取后，通过AB‑8大孔吸附树脂进行纯化，使得到的鬼针草总黄酮提取物的纯度可达50％以上，为鬼针草的充分开发及应用提供了科学的依据，且该方法简单、稳定、可行，制备过程中仅使用乙醇，不引入其他有机溶剂，适于工业化生产，具有很好的应用前景。

技术领域

本发明属于中药提取技术领域，尤其涉及一种鬼针草总黄酮的制备方法、检测方法及在糖尿病防治中的应用。

背景技术

鬼针草始载于《本草拾遗》，属于菊科(Asteraceae)、鬼针属(Bidens L.)植物，其味苦无毒，具有清热解毒、活血散瘀、消炎消肿的功效，也可用于治疗痢疾、感冒、腹泻、炎症等。鬼针草含有多种具有生物活性的化学成分，主要包括黄酮类、挥发油类、酚酸类、有机酸类及甾体类环合物等。

现代药理作用研究表明，鬼针草提取物具有抗氧化、抗炎、抗菌、肝保护作用及降血糖作用；鬼针草乙醇提取物的乙酸乙酯和正丁醇萃取物能够降低正常小鼠的其中乙酸乙酯提取物具有降低四氧嘧啶高血糖小鼠血糖的作用。有研究也发现，鬼针草总黄酮对糖尿病小鼠具有降血糖作用，其作用机制为通过调控PI3K/AKT/GLUT4信号通路中转录因子的基因和蛋白的表达，从而改善细胞胰岛素抵抗(黄桂红,刘天旭,朱钊铭,等.鬼针草黄酮对HepG2胰岛素抵抗细胞PI3K/AKT1/GLUT4信号通路的调控作用[J].实用医学杂志,2016,32(24):3994-3998)。

也有专利和相关文献对鬼针草总黄酮的纯化方法进行了研究。如中国专利(公开号：CN101185665A)公开了一种鬼针草总黄酮的制备方法，采用乙醇回流，以有机溶剂萃取脱脂后，用与水不互溶的中等极性有机溶剂萃取，最后用树脂进行总黄酮的纯化；有文献研究报道了运用HPD-100型大孔吸附树脂纯化鬼针草叶总黄酮的工艺，结果显示总黄酮纯度较高，达到62.86％(张世明，姜艳玲，周洪雷，等.响应面法优化鬼针草叶总黄酮大孔树脂纯化工艺.辽宁中医药大学学报.2017,19(2):39-43.)；同时还有文献报道分别采用D-101和HPD-100型大孔树脂进行鬼针草总黄酮的分离纯化，结果显示纯化后干浸膏中总黄酮的纯度分别为22.36％和23.54％，但纯化后总黄酮的纯度较低，杂质含量高(邓亚宁，谢蓉蓉，杜瑞杰，等.大孔吸附树脂分离纯化鬼针草总黄酮的研究.中国药物与临床.2008,8(2):143-144.钟明媚,陈飞虎,袁丽萍,等.大孔吸附树脂纯化鬼针草总黄酮的工艺研究.安徽医科大学学报,2007,42(4):424-427.)；还有文献报道采用大孔树脂分离纯化鬼针草总黄酮，在纯化工艺中分别进行石油醚脱脂及不同浓度的乙醇洗脱，虽提高了总黄酮浓度，但不可避免的引入了有机溶剂及提高了洗脱剂的用量(瞿慧,曹园,方祝元,等.大孔吸附树脂纯化鬼针草总黄酮的工艺优选.中国医药指南,2013(34):67-69.魏英勤,马毅,王云云.大孔吸附树脂分离纯化鬼针草总黄酮的研究.时珍国医国药,2006,17(11):2257-2258.)。

并且目前鬼针草总黄酮提取物中的成分并不明确，限制了其充分开发。

发明内容

有鉴于此，本发明要解决的技术问题在于提供一种鬼针草总黄酮的制备方法、检测方法及在糖尿病预防和治疗方面的应用，该制备方法得到的鬼针草总黄酮纯度高且并不引入其他有机溶剂。

本发明提供了一种鬼针草总黄酮的制备方法，包括：

S1)将鬼针草与乙醇水溶液混合，加热回流进行提取，得到鬼针草总黄酮提取液；

S2)将所述鬼针草总黄酮提取液的pH值调节至弱酸性，然后采用AB-8大孔吸附树脂进行纯化，得到鬼针草总黄酮提取物。