[发明专利]一种达托霉素的纯化方法在审
| 申请号： | 201911317729.0 | 申请日： | 2019-12-19 |
| 公开（公告）号： | CN113004373A | 公开（公告）日： | 2021-06-22 |
| 发明（设计）人： | 张贵民;郭朝江;史新强;朱兵峰 | 申请（专利权）人： | 鲁南制药集团股份有限公司 |
| 主分类号： | C07K7/08 | 分类号： | C07K7/08;C07K1/20;C07K1/18;C07K1/34;C07K1/36 |
| 代理公司： | 暂无信息 | 代理人： | 暂无信息 |
| 地址： | 276006 *** | 国省代码： | 山东;37 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 霉素 纯化 方法 | ||
1.一种达托霉素的纯化方法，其特征在于，包括如下步骤：
(1)陶瓷膜过滤达托霉素发酵液；
(2)疏水树脂层析；
(3)离子交换树脂层析；
(4)疏水树脂层析除盐、除内毒素；
(5)纳滤浓缩；
(6)冷冻干燥。
2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤(2)所述的疏水树脂为XR3SP树脂或XR30SP树脂。
3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤(2)所述的疏水树脂层析步骤包括树脂柱平衡，上样，梯度冲洗过程；梯度冲洗过程为上样结束后用含有乙酸钠的乙腈水溶液梯度冲洗。
4.根据权利要求3所述的方法，其特征在于，所述的梯度冲洗过程如下：先用pH4.0～4.5含3～4g/L乙酸钠的15～20％乙腈水溶液洗涤，然后再用pH5.0～5.5含3～4g/L乙酸钠的15～20％乙腈水溶液洗涤，最后用pH5.5～6.0含3～4g/L乙酸钠的25～30％乙腈水溶液洗脱；收集含达托霉素的洗脱流出液。
5.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤(3)所述的离子交换树脂为NQ-M树脂。
6.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤(3)所述的离子交换树脂层析过程包括树脂柱平衡，上样，梯度冲洗过程；梯度冲洗过程为上样结束后用含乙酸钠的氯化钠溶液梯度冲洗。
7.根据权利要求6所述的方法，其特征在于，所述梯度冲洗过程为先用pH5.0～5.5含1.5～2.0g/L乙酸钠的1.2～3g/L氯化钠溶液洗涤，然后用pH5.0～5.5含1.5～2.0g/L乙酸钠的4～8g/L氯化钠溶液洗脱；收集含达托霉素的洗脱流出液。
8.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤(4)所述疏水树脂为XR30SP树脂。
9.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述步骤(4)包括将步骤(3)所得收集液调pH2.6～3.6，上样疏水树脂柱，上样结束后用10～20％乙醇溶液洗涤，再用75～85％乙醇溶液进行洗脱，收集含达托霉素的洗脱流出液。
10.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤(5)是采用聚醚砜纳滤膜进行纳滤浓缩，纳滤膜截留分子量为200～1000道尔顿。
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