[发明专利]一种金线莲原球茎仿野生培育种苗的方法

权利要求书

1.一种金线莲原球茎仿野生培育种苗的方法，包括以下步骤：

（1）金线莲成熟蒴果无菌播种：将成熟蒴果在天晴日采摘回来，在超净工作台上，用75%乙醇灭菌30 s，无菌水冲洗1次，用无菌纸吸干蒴果表面水分；再用0.1%升汞灭菌10 min，无菌水冲洗5次，用无菌纸吸干蒴果表面水分；横切开蒴果一端，将种子播种于初代培养基上，暗培养5天后，进行光培养，15～20天后种子吸水变圆变绿；30～45天萌发形成原球茎，种子萌发率为53.7%～88.5%；

所述的初代培养基为MS+6-BA0.5～2.0 mg/L+GA0.1～1.0 mg/L+NAA0.1～0.5 mg/L+10%椰子汁+白糖25 g/L+琼脂4 g/L；

（2）原球茎增殖培养：将步骤（1）得到的原球茎团切分成小团接入增殖培养基中培养，10天后原球茎开始增殖，30天后统计增殖系数，为1.8～4.1；

所述的原球茎增殖培养基为MS+CPPU0.05～0.5 mg/L+TDZ0.1～1.0 mg/L+NAA0.1～0.5 mg/L+10%椰子汁+白糖25 g/L+琼脂4 g/L；

所述增殖培养条件是：温度为25±3℃, 光照时间为6 h/天, 光照强度为500 lx；

（3）金线莲原球茎仿野生培育种苗：

（3.1）林地选取和育苗基质准备：林地的郁闭度90%，地面铺上一层1 cm厚的基质，基质按羊粪10～30%、牛粪10～40%、黄土30～80%比例粉碎混合均匀，在撒播原球茎的前两天喷淋水，备用；

（3.2）在4月～6月份期间，将步骤（2）得到原球茎取出，洗净培养基，撒播到林地的基质上，盖上一层厚度为0.5 cm的树叶，用薄膜做成一个个拱棚，拱棚内的湿度为80%，15～25天后，原球茎上开始长出小芽，25～30 天后小芽基部突起，30～40 天后开始长根，50～65天长成有2～3条根和2～3片叶的小苗，小苗的成活率61.3%～92.6%。

2.根据权利要求1所述的金线莲原球茎仿野生培育种苗的方法，其特征在于：

步骤（1）所述的初代培养基为MS+6-BA1.0 mg/L+GA0.5 mg/L+NAA0.3mg/L+10%椰子汁+白糖25 g/L+琼脂4 g/L；

步骤（2）所述的原球茎增殖培养基为MS+CPPU0.2 mg/L+TDZ0.4 mg/L+NAA0.3mg/L+10%椰子汁+白糖25 g/L+琼脂4 g/L。