[发明专利]一种金线莲原球茎仿野生培育种苗的方法

说明书

本发明公开了一种金线莲原球茎仿野生培育种苗的方法，以金线莲成熟蒴果为材料，灭菌后，将蒴果切开，把种子播种于培养基上，种子萌发形成原球茎后，进行增殖培养，之后将原球茎直接撒播在野外富含腐殖质的林地里，以薄膜做成一个个的小拱棚，让原球茎在具有一定湿度的小拱棚里长根长芽，吸取大自然中的养分，在小苗长到2～3片叶时可以撤掉薄膜，完成金线莲原球茎仿野生种苗繁育。采用本发明方法，金线莲成苗时间短、成活率高、整齐度好、无变异、采摘时无植物生长调节剂残留，且植株抗逆性好、生长快、产量高，既解决了目前金线莲生产中的实际问题，又可有效缓解金线莲的供需矛盾，产品高产优质，效益好，成本低。

技术领域

本发明属于中药材栽培技术领域，具体涉及一种金线莲原球茎仿野生培育种苗的方法。

背景技术

金线莲(Anoectochilusroxburghii (Wall.) Lindl.)为兰科开唇兰属植物，是我国传统珍贵药材，全株药用，含有多糖、黄酮类、生物碱、微量元素等成分，具有祛风利湿、平肝、降血糖等功效，在糖尿病、血尿、抗肿瘤以及多种炎症等方面疗效好。金线莲在民间素有“药王”等美称，在福建、台湾和广东等地常作为高档食材用于煲汤滋补。

随着人们生活水平不断提高，更加注重健康和养生，对于药食两用的金线莲需求与日俱增，其中日本和韩国年均需求量为1000 吨以上， 700吨左右基本上从我国进口。而野生金线莲因种子细小在自然环境下难以萌发，繁殖和生长的速度缓慢，加上农民对其进行掠夺式采挖，使得野生金线莲变得日渐匮乏，处于濒危状态。野生金线莲供需矛盾日益尖锐，市场价格居高不下，鲜品为800～1000元/kg，以亩产80kg计，亩产值6.4～8万元。

加快金线莲的人工栽培势在必行，种苗成了金线莲人工栽培的关键因素。虽然目前金线莲的植物组织培养技术已经突破瓶颈有了较好的发展，但是依然存在着生根过程比较缓慢、繁殖周期长、变异性高、整齐度低、成活率低、生产成本高以及植物生长调节剂残留等问题，如何解决当前金线莲组培苗存在的问题，将是解决金线莲实际生产问题的关键。

发明内容

在金线莲种植过程中，发明人发现有少量植株基部能产生原球茎，并发育成小苗，但是量很少，而且原球茎越大，苗就越壮，长势越好。为了解决金线莲组培苗当前生产过程中存在的问题，加快金线莲仿野生栽培，本发明提出一种金线莲原球茎仿野生培育种苗的方法。

本发明一种金线莲原球茎仿野生培育种苗的方法，包括以下步骤：

（1）金线莲成熟蒴果无菌播种：将成熟蒴果在天晴日采摘回来，在超净工作台上，用75%乙醇灭菌30 s，无菌水冲洗1次，用无菌纸吸干蒴果表面水分；再用0.1%升汞（HgCl₂）灭菌10 min，无菌水冲洗5次，用无菌纸吸干蒴果表面水分；横切开蒴果一端，将种子播种于初代培养基上，在培养室中培养，先暗培养5 天后，进行光培养，15～20天后种子吸水变圆变绿；30～45天萌发形成原球茎，种子萌发率为53.7%～88.5%；

所述的初代培养基为MS+6-BA0.5～2.0 mg/L+GA0.1～1.0 mg/L+NAA0.1～0.5mg/L+10%椰子汁+白糖25 g/L+琼脂4 g/L；

（2）原球茎增殖培养：将步骤（1）得到的原球茎团切分成小团接入增殖培养基中培养，10 天后原球茎开始增殖，30 天后统计增殖系数，为1.8～4.1；

所述的原球茎增殖培养基为MS+CPPU0.05～0.5 mg/L+TDZ0.1～1.0 mg/L+NAA0.1～0.5 mg/L+10%椰子汁+白糖25 g/L+琼脂4 g/L；

所述培养条件是：温度为25±3℃, 光照时间为6 h/d, 光照强度为500 lx；

（3）金线莲原球茎仿野生培育种苗：