[发明专利]一种鹅不食草多糖及其制备方法和应用有效
申请号: | 201911318346.5 | 申请日: | 2019-12-19 |
公开(公告)号: | CN111116770B | 公开(公告)日: | 2021-08-10 |
发明(设计)人: | 李琳;陈君诚;李冰;张霞;郑青松;霍达;梁毅 | 申请(专利权)人: | 华南理工大学;广东中轻枫泰生化科技有限公司 |
主分类号: | C08B37/00 | 分类号: | C08B37/00;A61P39/06;A61P3/10;A23L33/125;A23L29/30 |
代理公司: | 广州市华学知识产权代理有限公司 44245 | 代理人: | 桂婷 |
地址: | 510640 广*** | 国省代码: | 广东;44 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 鹅不食草 多糖 及其 制备 方法 应用 | ||
1.一种鹅不食草均一多糖,命名为CMP-2B,其特征在于由以下方法制备得到:
将鹅不食草粉碎,加乙醇回流脱脂脱色,再在60-90℃下热水浸提2-4小时,得到水提液;在水提液中添加无水乙醇使鹅不食草水提液中的乙醇浓度达到75-85%进行醇沉分离,得到鹅不食草粗多糖;利用Sevag试剂除去蛋白后,经纤维素DEAE-52阴离子交换树脂进行分级分离,依次以水、0.1 mol/L、0.2 mol/L及0.5 mol/L的NaCl溶液洗脱,收集0.1 mol/LNaCl溶液洗脱组分,再经G-200凝胶柱纯化,合并收集第一个吸收峰,得到鹅不食草均一多糖CMP-2B。
2.根据权利要求1所述的鹅不食草均一多糖,其特征在于:
所述的鹅不食草均一多糖CMP-2B分子量分布范围为80-200 KDa,重均分子量为126.35KDa。
3.一种根据权利要求1或2所述的鹅不食草均一多糖的制备方法,其特征在于包括以下步骤:
将鹅不食草粉碎,加乙醇回流脱脂脱色,再在60-90℃下热水浸提2-4小时,得到水提液;在水提液中添加无水乙醇使鹅不食草水提液中的乙醇浓度达到75-85%进行醇沉分离,得到鹅不食草粗多糖;利用Sevag试剂除去蛋白后,经纤维素DEAE-52阴离子交换树脂进行分级分离,依次以水、0.1 mol/L、0.2 mol/L及0.5 mol/L的NaCl溶液洗脱,收集0.1 mol/LNaCl溶液洗脱组分,再经G-200凝胶柱纯化,合并收集第一个吸收峰,得到鹅不食草均一多糖CMP-2B。
4.根据权利要求3所述的鹅不食草均一多糖的制备方法,其特征在于:
所述脱脂脱色的条件为在70-80℃回流2-4小时。
5.根据权利要求3所述的鹅不食草均一多糖的制备方法,其特征在于:
所述醇沉分离指向水提液中加入无水乙醇后,在-4℃条件下静置8-24小时,离心,收集鹅不食草粗多糖;
所述除去蛋白的操作具体为将粗多糖溶于水中,加入Sevag试剂,震荡,离心,收集上清液,重复除蛋白8-10次,透析,冷冻干燥,得到除蛋白鹅不食草粗多糖。
6.根据权利要求3所述的鹅不食草均一多糖的制备方法,其特征在于:
所述分级分离前将除去蛋白的鹅不食草粗多糖溶于水,以8000-10000r/min速度离心6-10min,取上清液再经纤维素DEAE-52阴离子交换树脂进行分级分离;
所述经G-200凝胶柱纯化,指将分级分离后的产物溶于水中,离心,上清液经SephadexG-200凝胶柱进行纯化,以水洗脱,苯酚-硫酸法检测,收集第一组分,浓缩,透析,冷冻干燥,得到纯化的鹅不食草均一多糖CMP-2B。
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