[发明专利]一种用于检测泰和乌鸡鸡蛋的引物、试剂盒及检测方法有效
申请号: | 201911318963.5 | 申请日: | 2019-12-19 |
公开(公告)号: | CN110982909B | 公开(公告)日: | 2020-08-07 |
发明(设计)人: | 许继国;饶友生;周敏;马荆鄂;朱学农;谭玉文;贡继尚;杨艳北;李袁飞;许桥;熊信威;王樟凤;陈智武;陈听冲;彭建军 | 申请(专利权)人: | 南昌师范学院 |
主分类号: | C12Q1/6888 | 分类号: | C12Q1/6888;C12Q1/6858;C12N15/11 |
代理公司: | 北京汇信合知识产权代理有限公司 11335 | 代理人: | 张焕响 |
地址: | 330032 江西*** | 国省代码: | 江西;36 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 用于 检测 泰和 乌鸡 鸡蛋 引物 试剂盒 方法 | ||
1.一种用于检测泰和乌鸡鸡蛋的引物,其特征在于,包括:SF1:cccccactcagagcgctctg,SR1:ggcggaccggcgcggcctta,SF2:ccgcgagaggccgtcaggcg以及SR2:ttgcgccctgggggcagcca。
2.一种用于检测泰和乌鸡鸡蛋的检测方法,其特征在于,包括以下步骤:提取待测鸡蛋基因组DNA,使用引物SF1:cccccactcagagcgctctg,SR1:ggcggaccggcgcggcctta进行第一步PCR扩增,以第一次扩增得到的PCR产物作为模板,利用引物SF2:ccgcgagaggccgtcaggcg,SR2:ttgcgccctgggggcagcca进行第二次PCR扩增,根据所得的第二步PCR产物基因序列68bp处碱基进行基因分型,当该位置碱基为G时,为泰和乌鸡鸡蛋;当该位置基因为C时,为非泰和乌鸡鸡蛋。
3.如权利要求2所述的用于检测泰和乌鸡鸡蛋的检测方法,其特征在于,第一步PCR扩增时,引物为权利要求1所述的SF1:cccccactcagagcgctctg,SR1:ggcggaccggcgcggcctta;
30μL扩增体系:模板DNA 2μL,2×PCR mix 15μL,混合引物0.6μL,其余为水;
扩增程序:95℃ 3min;94℃ 15s、55℃ 30s、72℃ 20s,20个循环;72℃,3min。
4.如权利要求2所述的用于检测泰和乌鸡鸡蛋的检测方法,其特征在于,第二步PCR扩增时,引物为权利要求1所述的SF2:ccgcgagaggccgtcaggcg,SR2:ttgcgccctgggggcagcca;
20μL扩增体系:第一次PCR产物1μL;2×PCR mix 10μL,混合引物0.4μL,其余为水;
扩增程序:96℃ 3min;96℃ 30s、52℃ 30s、72℃ 30s,35个循环。
5.如权利要求2-4任一项所述的用于检测泰和乌鸡鸡蛋的检测方法在鉴别泰和乌鸡鸡蛋上的应用。
6.一种包含权利要求1所述的用于检测泰和乌鸡鸡蛋的引物的试剂盒。
7.一种如权利要求6所述的试剂盒在鉴别真伪泰和乌鸡鸡蛋上的应用。
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