[发明专利]一种嗜热脂肪地芽孢杆菌芽孢的制备和萌发方法及其应用

权利要求书

1.一种嗜热脂肪地芽孢杆菌芽孢的萌发方法，其特征在于，包括将所述芽孢加至萌发培养基中的步骤，其中所述萌发培养基1000mL体系如下：蛋白胨5-20g，可溶性淀粉0.5-7.0g，果糖0.2-5.0g，蔗糖0.2-5.0g，麦芽糖0.2-5.0g，L-丙氨酸0.1-3.0g，L-天冬酰胺0.05-0.30g，溴甲酚紫0.01-0.10g，磷酸氢二钾0.25-2.5g，利用纯化水配置1000mL，调pH至7.2-7.4，其中，所述嗜热脂肪地芽孢杆菌芽孢的制备方法包括以下步骤：

（1）菌种活化：用PBS缓冲液将嗜热脂肪地芽孢杆菌（GebacillusStearothermophilus）菌株ATCC 7953冻干粉制备成菌悬液，涂布于TSA培养基上进行活化；

（2）菌种制备：将活化的菌种接种到TSB培养基，振荡培养10-20h；

（3）将菌种在诱导培养基中进行再次增殖；

（4）芽孢诱导：将菌种接种至诱导培养基中进行诱导培养，收集嗜热脂肪地芽孢杆菌菌体及芽孢，去除菌体后即得到嗜热脂肪地芽孢杆菌芽孢，

其中，

所述TSA培养基1000mL体系如下：胰蛋白胨15g，大豆蛋白胨5g，氯化钠5g，琼脂16g，利用纯化水配置1000mL，调pH至7.2±0.2；

所述TSB培养基1000mL体系如下：胰蛋白胨17g，大豆蛋白胨3g，氯化钠5g，葡萄糖2.5g，无水磷酸氢二钾2.5g，利用纯化水配置1000mL，调pH至7.2±0.2；

所述诱导培养基1000mL体系如下：胰蛋白胨3.0-12g，酸水解酪蛋白1.0-6.0g，酵母提取粉1.0-6.0g，牛肉浸粉1.0-6.0g，氯化钾10.0-60.0mg，氯化钙0.1-0.6g，氯化锰2.0-20.0mg，硫酸镁0.2-0.8mg，利用纯化水配置1000mL，调pH至7.2±0.2。

2.根据权利要求1所述的萌发方法，其特征在于，所述再次增殖的步骤为：

将步骤（2）获得的菌种接种于诱导培养基中增殖培养10-20h。