[发明专利]一种鸡骨草提取物特征图谱的检测方法

权利要求书

1.一种鸡骨草提取物特征图谱的检测方法，其特征在于：包括以下步骤：

（1）、供试品溶液的制备：取鸡骨草提取物，用体积比为(100～50) mL∶(0～50) mL甲醇/水混合溶液溶解，超声提取20—40min，冷却，过0.45μm滤膜，取滤液，制成每1mL含8—12mg的溶液备用；

（2）、参照物溶液的制备：取夏佛塔苷对照品，加甲醇制成每1mL含0.3mg的溶液；

（3）、色谱条件：色谱柱：十八烷基硅烷键合硅胶为填料；流动相：流动相A为甲醇，流动相B为0.1%磷酸/水混合液，梯度脱洗；检测器：二极管阵列检测器，检测波长为190—600nm；柱温：15°—35°；流速：0.8—1.2mL/min；

（4）、测试：分别精密吸取参照物溶液和供试品溶液各10μl，注入液相色谱仪，照高效液相色谱法测定，得到鸡骨草提取物的HPLC特征图谱。

2.根据权利要求1所述的一种鸡骨草提取物特征图谱的检测方法，其特征在于：步骤（1）所述供试品溶液的制备步骤如下：取鸡骨草提取物，用50％甲醇/水混合溶液溶解，超声提取30min，冷却，过0.45μm滤膜，取滤液，制成每1mL含10mg的溶液。

3.根据权利要求1所述的一种鸡骨草提取物特征图谱的检测方法，其特征在于：步骤（2）所述参照物溶液的制备步骤如下：取夏佛塔苷对照品，加甲醇制成每1mL含0.3mg的溶液。

4.根据权利要求1所述的一种鸡骨草提取物特征图谱的检测方法，其特征在于：所述色谱条件：色谱柱：十八烷基硅烷键合硅胶为填料；流动相：流动相A为甲醇，流动相B为0.1%磷酸/水混合液，梯度脱洗；检测器：二极管阵列检测器，检测波长为300nm；柱温：30°；流速：1.0mL/min；进样量：10μL。

5.根据权利要求1所述的一种鸡骨草提取物特征图谱的检测方法，其特征在于：所述梯度洗脱的过程为：0～45min，流动相A为24～28％，流动相B为76～72％；45～65min，流动相A为28～40％，流动相B为72～60％；65～70min，流动相A为40％，流动相B为60％。

6.根据权利要求1所述的一种鸡骨草提取物特征图谱的检测方法，其特征在于：在鸡骨草提取物特征图谱中，以夏佛塔苷为参照峰，各特征峰的相对保留时间如下：峰1：0.567、峰2：0.876、峰3：1、峰4：1.421、峰5：1.474；其中，峰1、峰2及峰4的相对保留时间在上述值的±5％之内，峰5的相对保留时间在上述值的±10％之内。