[发明专利]一种鸡骨草提取物特征图谱的检测方法

说明书

本发明公开了一种鸡骨草提取物特征图谱的检测方法，属于中药检测技术领域，包括以下步骤：（1）、供试品溶液的制备；（2）、参照物溶液的制备；（3）、色谱条件：色谱柱：十八烷基硅烷键合硅胶为填料；流动相：流动相A为甲醇，流动相B为0.1%磷酸/水混合液，梯度脱洗；检测器：二极管阵列检测器，检测波长为190—600nm；柱温：15°—35°；流速：0.8—1.2mL/min；进样量：10μL；（4）、测试：分别精密吸取参照物溶液和供试品溶液各10μl，注入液相色谱仪，照高效液相色谱法测定，得到鸡骨草提取物的HPLC特征图谱。本发明具有通用性和专属性，灵敏度高，操作方便，分析时间适中，为鸡骨草提取物质量控制提供了有效保障。

技术领域

本发明属于中药检测技术领域，具体涉及一种鸡骨草提取物特征图谱的检测方法。

背景技术

中药鸡骨草最早出自《岭南采药录》，自1977年以来各版《中华人民共和国药典》均有收载，2015版《中华人民共和国药典》规定鸡骨草来源为豆科植物广州相思子在我国鸡骨草主要分布在广东、广西等地，并为两广的道地药材。鸡骨草中含有多种化学成分，其中三萜、黄酮、生物碱类物质是鸡骨草的主要有效活性成分。鸡骨草具有保肝护肝、降脂、抗菌和抗病毒、抗氧化、抗炎、免疫调节等作用，并在临床应用中有很好的疗效。因此，研究鸡骨草中的化学成分，有利于进一步开发和利用鸡骨草。

现有方法只能控制药材，不能控制提取物等，在2015年版《中国药典》中对鸡骨草的质量控制仅有显微鉴别、薄层鉴别及浸出物3种方式，无含量测定及指纹测定，对鸡骨草的质量不能进行有效的控制。查阅大量文献发现，现有的研究，只有含量测定，即单一成分的检测，控制不全面，不能整体体现，对药效物质基础的研究还远远不够，这大大影响了鸡骨草的进一步开发利用。

发明内容

为解决前述问题，本发明提供了一种鸡骨草提取物特征图谱的检测方法。

本发明的目的是通过以下技术方案实现的：

一种鸡骨草提取物特征图谱的检测方法，其特征在于：包括以下步骤：

（1）、供试品溶液的制备：取鸡骨草提取物，用体积比为(100～50) mL∶(0～50) mL甲醇/水混合溶液溶解，超声提取20—40min，冷却，过0.45μm滤膜，取滤液，制成每1mL含8—12mg的溶液备用；

（2）、参照物溶液的制备：取夏佛塔苷对照品，加甲醇制成每1mL含0.3 mg的溶液；

（3）、色谱条件：色谱柱：十八烷基硅烷键合硅胶为填料，柱长为250 mm，内径为4.6 mm，硅胶粒径为5 μm；流动相：流动相A为甲醇，流动相B为0.1%磷酸/水混合液，梯度脱洗；检测器：二极管阵列检测器，检测波长为190—600nm；柱温：15°—35°；流速：0.8—1.2mL/min；

（4）、测试：分别精密吸取参照物溶液和供试品溶液各10μl，注入液相色谱仪，照高效液相色谱法测定，得到鸡骨草提取物的HPLC特征图谱。

优选的，步骤（1）所述供试品溶液的制备步骤如下：取鸡骨草提取物，用50％甲醇/水混合溶液溶解，超声提取30min，冷却，过0.45μm滤膜，取滤液，制成每1mL含10mg的溶液。

优选的，步骤（2）所述参照物溶液的制备步骤如下：取夏佛塔苷对照品，加甲醇制成每1mL含0.3mg的溶液。

优选的，所述色谱条件：色谱柱：十八烷基硅烷键合硅胶为填料，柱长为250 mm，内径为4.6 mm，硅胶粒径为5 μm；流动相：流动相A为甲醇，流动相B为0.1%磷酸/水混合液，梯度脱洗；检测器：二极管阵列检测器，检测波长为300nm；柱温：30°；流速：1.0mL/min。