[发明专利]利用基因操作技术构建视网膜新生血管疾病动物模型的方法、培育方法和应用

说明书

本发明公开了及一种利用基因操作技术构建视网膜新生血管疾病动物模型的方法、培育方法和应用，涉及基因编辑技术领域。本发明公开的构建方法利用基因操作技术使目标动物的血管内皮细胞中的Ctnnd1基因不表达或者其表达受到抑制。通过该方法可以得到视网膜新生血管疾病动物模型，丰富了视网膜新生血管疾病动物模型的种类，为视网膜新生血管疾病的相关研究提供了更多样的模型选择，也有利于促进视网膜新生血管疾病的科学研究和相关治疗药物的开发等。

技术领域

本发明涉及基因编辑技术领域，具体而言，涉及一种利用基因操作技术构建视网膜新生血管疾病动物模型的方法、培育方法和应用。

背景技术

视网膜新生血管（Retinal neovascularization, RNV）相关性眼部疾病是一类以病理性视网膜新生血管为主要特征的疾病，主要包括增殖性糖尿病视网膜病变（proliferative diabetic retinopathy，PDR）、早产儿视网膜病变（retinopathy ofprematurity，ROP）等。该类疾病的发病率高、治疗预后差，故具有较高的致盲率，严重危害人类视力健康。目前，临床上针对RNV的治疗，除了疾病早期进行的激光光凝、眼内注射抗血管内皮细胞生长因子（vascular endothelial growth factor, VEGF）药物以外，尚无更加有效的治疗方法。并且，研究表明抗 VEGF 治疗并非对所有患者均有效；同时抗 VEGF 治疗存在价格昂贵、需反复注射增加患者感染风险等诸多缺点，导致其临床运用受限。因此，在进行RNV发病机理研究的同时，构建有效的动物模型以寻求新的有效治疗手段或治疗靶点，是亟待解决的医学问题。

目前，缺乏可用于RNV研究的视网膜新生血管疾病的动物模型。

鉴于此，特提出本发明。

发明内容

本发明的目的在于提供一种新的利用基因操作技术构建视网膜新生血管疾病动物模型的方法、培育方法和应用。本发明提供了一种新的构建视网膜新生血管疾病动物模型的方法，通过该方法可以得到视网膜新生血管疾病动物模型，丰富了视网膜新生血管疾病动物模型的种类，为视网膜新生血管疾病的相关研究提供了更多样的模型选择，有利于促进视网膜新生血管疾病的科学研究和相关治疗药物的开发等。

本发明是这样实现的：

第一方面，本发明实施例提供一种利用基因操作技术构建视网膜新生血管疾病动物模型的方法，利用基因操作技术使目标动物的血管内皮细胞中的Ctnnd1基因不表达或者其表达受到抑制。

Ctnnd1基因（NM_001085458）位于第11号染色体上，是连环蛋白家族的成员，位于细胞黏附连接区域，与钙黏蛋白家族成员Cadherinn存在相互作用。此外，它被报道参与多种信号通路，如Wnt信号通路、Rho GTP酶信号通路、TGF-β信号通路等等。本发明发现，Ctnnd1基因与视网膜新生血管疾病相关，使Ctnnd1基因在动物的血管内皮细胞中不表达或者其表达受到抑制，可以使得该动物具有视网膜色素变性疾病的表型，这是一种理想的视网膜色素变性疾病模型。

在可选的实施方式中，所述目标动物为非人哺乳动物。

在可选的实施方式中，所述哺乳动物选自牛、羊、马、兔、小鼠、大鼠、绵羊和猪中的任意一种。

本发明的目标动物可以是具有Ctnnd1基因的任意非人哺乳动物，其只要有Ctnnd1基因，能够起到模拟作用即可。

在可选的实施方式中，所述基因操作技术选自基因敲除技术、基因编辑技术和RNA干扰技术中的一种或几种的组合。