[发明专利]一种脂类化合物组合在T细胞培养中的应用

权利要求书

1.一种脂类化合物组合在T细胞培养时调节扩增终点的T细胞群体中CD4和CD8亚群比例的用途，其特征在于，所述脂类化合物组合包含α-生育酚醋酸，肉豆蔻酸，花生四烯酸，胆固醇，亚油酸，油酸，棕榈酸，硬脂肪酸，亚麻酸和棕榈油酸中的任意两种或两种以上脂类化合物。

2.根据权利要求1所述的用途，其特征在于，所述脂类化合物组合包含α-生育酚醋酸，肉豆蔻酸，花生四烯酸，胆固醇，亚油酸，油酸，棕榈酸，硬脂肪酸，亚麻酸和棕榈油酸中的任意八种或八种以上化合物。

3.根据权利要求1所述的用途，其特征在于，所述脂类化合物组合中，各脂类化合物的质量相等。

4.一种脂类化合物组合溶液，其特征在于，所述脂类化合物组合溶液的溶质为权利要求1-3任一所述的脂类化合物组合。

5.一种T细胞培养中调节扩增终点的T细胞群体中CD4和CD8亚群比例的方法，其特征在于，在培养基中添加权利要求4所述的脂类化合物组合溶液。

6.根据权利要求5所述的方法，其特征在于，所述脂类化合物组合溶液中各脂类化合物的浓度为0.0001-10g/L。

7.根据权利要求5所述的方法，其特征在于，所述方法包括以下步骤：

1)使用密度离心法从人全血中新鲜分离PBMC用于T细胞的激活扩增；

2)将分离好的PBMC细胞悬液转移至准备好的6孔板培养皿中，每孔培养基体积为2ml，并添加终浓度10μg/mL的CD3抗体，终浓度5μg/mL的CD28抗体，及终浓度100IU/mL的IL2，并放入37℃，5％二氧化碳培养箱内继续培养；上述培养体系中，使用的培养基为添加了脂类化合物组合溶液的T细胞无血清培养基，所述脂类化合物组合溶液中各脂类化合物浓度均为0.0001-10g/L；

3)将上述脂类化合物溶液按不同浓度添加至T细胞培养基中，使得培养终点的T细胞群体中具有不同比例的CD4和CD8亚群。

8.根据权利要求7所述的方法，其特征在于，培养体系中，所述脂类化合物组合溶液与T细胞无血清培养基的比例是1:10，1:20，1:50，1:100，1:200，1:500，1:1000，1:2000或1:5000。

9.根据权利要求7所述的方法，其特征在于，所述T细胞无血清培养基为X-Vivo-15或OpTmizer。

10.根据权利要求7所述的方法，其特征在于，培养第6天，离心收集细胞，并进行对细胞表现标志物CD4和CD8进行流式细胞仪检测。