[发明专利]一种脂类化合物组合在T细胞培养中的应用

说明书

本发明涉及一种脂类化合物组合在T细胞培养中的应用。所述脂类化合物组合包含α‑生育酚醋酸，肉豆蔻酸，花生四烯酸，胆固醇，亚油酸，油酸，棕榈酸，硬脂肪酸，亚麻酸和棕榈油酸中的任意两种或两种以上脂类化合物。将其以不同比例添加到T细胞培养基中，可以任意调节扩增终点的T细胞群体中CD4和CD8亚群比例，满足科研或临床应用的需求，而且该脂类化合物组合化学成份明确，为细胞培养过程中的常见营养物质，安全无害，无人源和动物源性成分，符合临床应用要求。本发明提供的方法具有很高的临床应用价值。

技术领域

本发明涉及细胞培养技术领域，具体地说，涉及一种脂类化合物组合在T细胞培养中的应用。

背景技术

T细胞是淋巴细胞的主要组分之一，它具有多种生物学功能，如直接杀伤靶细胞，辅助其它淋巴细胞发挥功能，对特异性抗原或促有丝分裂原的应答反应以及产生细胞因子，是身体抵御疾病感染、防止肿瘤形成的主要免疫细胞之一。在体外富集、活化、扩增这类免疫细胞，可用于回输治疗多种疾病，包括恶性肿瘤、感染、自身免疫病等。

T细胞根据表面分子标志物的不同，又可分为CD4阳性T细胞和CD8阳性T细胞。其中，CD4阳性T细胞约占T细胞总数的65％-70％，CD8阳性T细胞约占T细胞总数的30％-35％。CD4阳性T细胞又称为辅助性T细胞，它可以增殖并分泌细胞因子来激活其它类型的产生直接免疫反应的免疫细胞(如CD8阳性T细胞)；CD8阳性T细胞又称为细胞毒T细胞，其功能就像一个“杀手”或细胞毒素，可以对产生特殊抗原反应的目标细胞直接进行杀灭。

在T细胞过继免疫治疗中，已有证据表明CD4阳性T细胞和CD8阳性T细胞这两种细胞亚群在增殖、体内的持续性和在体外扩增后再过继回输的抗肿瘤效果方面均有所不同。临床前研究表明，通过固定CD4+/CD8+T细胞的比例配方形成的T细胞治疗细胞产品，比其中任一亚群或者不考虑亚群组成的T细胞产品效果更强。

现有技术的T细胞培养方法大多不考虑培养终点的T细胞群体中的CD4和CD8亚群的比例，或倾向于维持初始T细胞群体中的CD4和CD8亚群比例。

专利文献CN108441473A，公开日20180824，公开了一种体外培养T细胞的方法，该方法可以提高CD8+T细胞:CD4+T细胞比率并且/或者提高细胞含量。该方法包括获得外周血淋巴细胞(PBMC)细胞、对分离的PBMC进行分选以获得富含CD4+T细胞和CD8+T细胞的T细胞悬液、以及对分选后的T细胞悬液进行培养的步骤，其中在培养步骤中添加IL-2，优选还添加IL-7。

然而，探索更多的可调整培养的T细胞群体中CD4和CD8亚群比例的方法仍然是十分必要的。

发明内容

本发明的目的是针对现有技术中的不足，提供一种脂类化合物组合在T细胞培养中的应用，以调整培养的T细胞群体中CD4和CD8亚群的比例。

本发明再一的目的是，提供一种脂类化合物组合溶液。

本发明另一的目的是，提供一种T细胞培养中调节扩增终点的T细胞群体中CD4和CD8亚群比例的方法。

为实现上述第一个目的，本发明采取的技术方案是：

一种脂类化合物组合在T细胞培养时调节扩增终点的T细胞群体中CD4和CD8亚群比例的用途，所述脂类化合物组合包含α-生育酚醋酸，肉豆蔻酸，花生四烯酸，胆固醇，亚油酸，油酸，棕榈酸，硬脂肪酸，亚麻酸和棕榈油酸中的任意两种或两种以上脂类化合物。

作为本发明的一种优选实施方案，所述脂类化合物组合包含α-生育酚醋酸，肉豆蔻酸，花生四烯酸，胆固醇，亚油酸，油酸，棕榈酸，硬脂肪酸，亚麻酸和棕榈油酸中的任意八种或八种以上化合物。

作为本发明的另一种优选实施方案，所述脂类化合物组合中，各脂类化合物的质量相等。

为实现上述第二个目的，本发明采取的技术方案是：