[发明专利]一种快速检测黑果枸杞中花青素的方法

权利要求书

1.一种快速检测黑果枸杞中花青素的方法，包括以下步骤：

⑴在避光条件下，黑果枸杞鲜果用匀浆分散机以18000 r/min转速匀浆分散20 s制得鲜果匀浆；或将黑果枸杞干果除去可见杂质后，用食物粉碎机粉碎后，过40目筛，制得干果粉末；

⑵所述鲜果匀浆或所述干果粉末经盐酸-乙醇溶液超声提取后冷却至室温，再次称定重量，用提取液补足减失的重量，混匀；再以8000 r/min离心3 min，取上清液即得花青素提取液；所述鲜果匀浆与所述盐酸-乙醇溶液的质量比为1：10~50；所述干果粉末与所述盐酸-乙醇溶液的质量比为1：25~100；

⑶所述花青素提取液经所述盐酸-乙醇溶液稀释2~4倍，制得花青素稀释溶液；

⑷所述花青素稀释溶液分别用浓度为0.025 mol/L且pH=1.0的氯化钾缓冲溶液和浓度为0.4 mol/L且pH=4.5的乙酸钠缓冲溶液稀释5倍后，分别得到氯化钾-花青素检测溶液和乙酸钠-花青素检测溶液；

⑸所述氯化钾-花青素检测溶液和所述乙酸钠-花青素检测溶液室温静置10 min后，分别在545 nm和700 nm两个波长处测定共计4个吸光度值；

⑹按下式计算得到黑果枸杞中花青素的含量；

式中：

X——以矮牵牛素类成分计黑果枸杞中花青素的含量，单位为克每百克（g/100g）；

A——pH=1.0与pH=4.5的花青素检测溶液的吸光度差值，即A=(A_{545 nm}-A_{700 nm})pH1.0-(A_{545 nm}-A_700nm)pH4.5；

MW——矮牵牛素类衍生物的平均摩尔质量，单位为克每摩尔（g/mol），MW =912.3 g/mol；

DF——花青素稀释溶液倍数；

V——花青素提取液总体积，单位为毫升（mL）；

ε——矮牵牛素类衍生物的平均摩尔消光系数，单位为升每摩尔厘米（L/（mol·cm）），ε=29591 L/（mol·cm）；

1——比色皿厚度，单位为厘米（cm）；

m——鲜果匀浆或干果粉末的质量，单位为克(g)；

10——由g/kg换算为g/100g的转换因子；

每个样品取两个平行样进行测定，以其算术平均值作为测定结果，总花青素的含量≥1g/100g时，结果保留三位有效数字，总花青素的含量＜1 g/100g时，结果保留两位有效数字。

2.如权利要求1所述的一种快速检测黑果枸杞中花青素的方法，其特征在于：所述步骤⑵中盐酸-乙醇溶液是指在1L体积浓度为80%的乙醇溶液中加入40 mL体积浓度为36.5%的浓盐酸，混合均匀所得的溶液。

3.如权利要求1所述的一种快速检测黑果枸杞中花青素的方法，其特征在于：所述步骤⑵中超声提取的条件是指功率为360 W，温度为30~50℃，时间为20~40 min。

4.如权利要求1所述的一种快速检测黑果枸杞中花青素的方法，其特征在于：所述步骤⑹中矮牵牛素类花青素衍生物的平均摩尔质量912.3 g/mol是通过对氯化钾-花青素检测溶液进行HPLC-DAD-ESI/MSⁿ分析得到的。