[发明专利]一种快速检测黑果枸杞中花青素的方法

说明书

本发明涉及一种快速检测黑果枸杞中花青素的方法，包括以下步骤：⑴在避光条件下，黑果枸杞鲜果制得鲜果匀浆；或将黑果枸杞干果制得干果粉末；⑵鲜果匀浆或干果粉末经盐酸‑乙醇溶液超声提取即得花青素提取液；⑶花青素提取液稀释，制得花青素稀释溶液；⑷花青素稀释溶液分别用浓度为0.025 mol/L且pH=1.0的氯化钾缓冲溶液和浓度为0.4 mol/L且pH=4.5的乙酸钠缓冲溶液稀释5倍后，分别得到氯化钾‑花青素检测溶液和乙酸钠‑花青素检测溶液；⑸氯化钾‑花青素检测溶液和乙酸钠‑花青素检测溶液室温静置10 min后，分别在545 nm和700 nm两个波长处测定共计4个吸光度值；⑹按公式计算得到黑果枸杞中花青素的含量。本发明简单、准确、易于推广。

技术领域

本发明涉及一种快速检测花青素的方法，尤其涉及一种快速检测黑果枸杞中花青素的方法。

背景技术

黑果枸杞（Lycium ruthenicum Murr.）系茄科（Solanceae）枸杞属（Lycium L.）植物，是西北干旱地区一种特有的多年生灌木野生植物，尤其以柴达木和塔里木盆地分布最广。黑果枸杞耐干旱，生长于盐碱土荒地或沙地，可作为水土保持的灌木植物。其果实味甘、性平，清心热。据《四部医典》中记载，藏医将其用于治疗心热病、心脏病、月经不调、停经等病症；民间用作滋补强壮、明目及降压药。现代药理研究证明，黑果枸杞具有如下功效：（1）增强免疫力、预防癌症、延缓衰老。黑果枸杞含有的花青素（anthocyanins）是最有效的天然自由基清除剂，延缓人体细胞组织衰老，可防止皮肤皱纹的提早生成，保持年轻状态，延年益寿，并可让癌细胞无法顺利扩散，借此保护更多健康的细胞免于被癌细胞侵蚀，预防癌症。（2）生津止渴、改善循环。黑枸杞中的花青素能够改善血液循环，增加血管的弹性和微血管的通透性能。因此，花青素被称为“动脉粥样硬化的解毒药”。（3）明目作用。长期用黑枸杞泡茶喝，具有明显保护视力的作用，对青少年假性近视，中老年眼花、眼底出血，糖尿病视网膜病变，白内障，视疲劳，干眼症都有良好的保健作用。

黑果枸杞富含花青素，被人们称为“花青素之王”。 花青素是一类广泛存在于植物中的水溶性天然色素，属黄酮类化合物，多以糖苷的形式存在而成为花色苷。花青素作为一种天然食用色素，安全、无毒、资源丰富，而且具有一定营养和药理作用，在食品、化妆、医药等方面有着巨大的应用潜力。实验证明，花青素是迄今为止所发现的最强效的自由基清除剂，具有多种保健功能，近年来越来越备受人们的关注。目前，黑果枸杞花青素测定方法包括有效液相色谱法、色价法、消光系数法、pH示差法等：（1）用高效液相色谱法不仅可用于花青素的定性，还可用于定量分析，该法已被广泛地应用于水果、葡萄酒、果汁、花卉中花青素的定量分析。但高效液相色谱法存在柱平衡时间长、色谱柱易污染，测定时需要多种花青素标准品，而单一花青素标准品较难获得，本身在空气中易氧化稳定性较差且不易购买，从而限制其广泛使用；（2）色价法是我国习惯采用的表示色素含量的方法，它代表着全部发色物质占样品质量的百分率。色价也称为比吸光度，是指天然食用色素，其1 %浓度的溶液、透过1 cm比色皿在其最大吸收峰处的吸光度值。该方法快速准确，简便易行，且不需要标准样品。然而色价法仅仅是总花青素的百分比值，并且由于显色成分会因为采集的场所、季节、时期的不同而有所变化，难以对花青素混合物中的主体成分进行定量，不能得到花青素的准确含量；（3）消光系数法是用紫外分光光度计在全波长范围内扫描，测定待测液最大吸收波长。在其最大吸收波长测定样品的吸光值。由于不明确花青素的组成，只能将提取液看做一个花青素混合物，将总花青素平均消光系数代入到公式中计算，不能反映出花青素中的主成分含量，从而也就不能得出准确的测定结果；（4）pH示差法是在缓冲溶液中，花青素的结构随pH值改变而有几种形式的转变，其发色团的结构转换是pH的函数，而干扰物质（如褐色降解物）的特征光谱是不随pH值的改变而发生变化。所以，pH示差法不会受到体系中干扰物质的影响，它是测定总花青素的最佳选择。