[发明专利]一种银杏素的提取方法

权利要求书

1.一种银杏素的提取方法，其特征在于，包括以下步骤：

1）银杏素提取液的制备：将干燥银杏叶粉加入到去离子水中并加入纤维素酶和助溶剂，在一定温度条件下进行提取，然后过滤得到滤液，即为银杏素提取液；

2）从步骤1）中获得的银杏素提取液中分离纯化银杏素；

步骤2）中从银杏素提取液中分离纯化银杏素的具体步骤如下：

S1、将银杏素提取液用二氯甲烷常温下萃取，并将下层溶液减压浓缩获得浓缩物A；

S2、将步骤S1获得的浓缩物A使用金属络合法纯化获得浓缩物B；

S3、将步骤S2获得的浓缩物B加入填有交联环糊精的层析柱中进行柱层析，先用体积比为20：1的石油醚和乙酸乙酯混合溶液洗脱得到洗脱液I，再用体积比为8：1的石油醚和乙酸乙酯混合溶液洗脱得到洗脱液II，洗脱液II减压浓缩得到浓缩物C，即为银杏提取物；

S4、重结晶：将步骤S3得到的银杏提取物加入丙酮和活性炭，搅拌并过滤，滤液自然冷却析出，得到纯度更高的银杏提取物；

步骤S2中所述的金属络合法如下：

（1）将步骤S1得到的浓缩物A加入甲醇常温下搅拌溶解，过滤得到滤液；

（2）将步骤（1）获得的滤液加入硫酸锌和碳酸氢钠，常温下反应一段时间，离心得到沉淀物；

（3）将步骤（2）获得的沉淀物加入二氯甲烷溶液和硫化物，常温下搅拌一段时间后分层，下层溶液过滤，滤液减压浓缩得到浓缩物B；

步骤1）中助溶剂为表面活性剂和1-丁基-3-甲基咪唑四氟硼酸盐的混合液，表面活性剂为吐温-20或司盘-80，表面活性剂和1-丁基-3-甲基咪唑四氟硼酸盐的重量比为1：（0.1~1）；

步骤1）中是将过200目筛的干燥银杏叶粉加入4~10倍银杏叶粉质量的去离子水中，并加入0.001~0.01倍银杏叶粉质量的纤维素酶和0.1~0.5倍银杏叶粉质量的助溶剂，在温度50 ℃和超声功率500 w的条件下，提取0.5~4 h，过滤得到滤液。

2.根据权利要求1所述的银杏素的提取方法，其特征在于，步骤（1）中使用的甲醇的量为5~20倍银杏叶粉质量；步骤（2）中加入0.05~2倍银杏叶粉质量的硫酸锌和2~5倍质量的10%（W/V）碳酸氢钠到步骤（1）中获得的滤液中，常温下反应1~6 h；步骤（3）中加入5~40倍银杏叶粉质量的40%（V/V）二氯甲烷溶液和0.05~2倍银杏叶粉质量的硫化物到步骤（2）中获得的沉淀物中，常温下搅拌0.5~2 h后分层，下层溶液过滤，滤液在30~40 ℃下减压浓缩1~3 h得到浓缩物B。

3.根据权利要求1或2所述的一种银杏素的提取方法，其特征在于，所述硫化物为硫化钠、硫化钾或硫化铵中的一种。

4.根据权利要求1所述的银杏素的提取方法，其特征在于，步骤S1中，加入4~10倍银杏叶粉质量的二氯甲烷，下层溶液在30~40 ℃下减压浓缩1~3 h得到浓缩物A，步骤S4中，加入0.02~0.2倍银杏叶粉质量的丙酮和0.0001~0.001倍银杏叶粉质量的活性炭，40~60 ℃条件下搅拌0.5~2 h，过滤。

5.根据权利要求1所述的银杏素的提取方法，其特征在于，步骤S3中，使用0.2~1倍银杏叶粉质量的交联环糊精填充层析柱，先用1~4倍柱体积的 体积比为20：1的石油醚和乙酸乙酯混合溶液洗脱得到洗脱液I，再用3~10倍柱体积的体积比为8：1的石油醚和乙酸乙酯混合溶液洗脱得到洗脱液II，洗脱液II在30~60 ℃条件下减压浓缩1~5 h得到浓缩物C。

6.根据权利要求1或5所述的银杏素的提取方法，其特征在于，交联环糊精的制备方法为：将β-环糊精溶于干燥的N,N-二甲基甲酰胺中，加入氢化钠，搅拌1 h，过滤，在滤液中加入KH-560，90℃反应10 h；加入100~200目硅胶于90 ℃继续反应24 h，抽滤，用丙酮洗涤，滤饼80 ℃真空干燥24 h，得到交联β-环糊精。