[发明专利]一种银杏素的提取方法

说明书

本发明提供一种银杏素的提取方法，具体涉及中药提取工艺技术领域，包括银杏素提取液的制备和从银杏素提取液中分离纯化银杏素，银杏素提取液的制备方法是将干燥银杏叶粉加入到去离子水中并加入纤维素酶和助溶剂，在一定温度条件下进行提取，然后过滤得到滤液，即为银杏素提取液。本发明在水中提取，有机溶剂用量少，在纤维素酶法提取过程中，加入助溶剂增加了银杏叶中低极性成分的溶解性，从而提高了银杏素的提取率，且银杏素提取液的获得的工艺条件要求低。

技术领域

本发明属于中药提取工艺技术领域，具体涉及银杏素的提取方法。

背景技术

银杏素是一种3’,8’’-双芹菜素型双黄酮，在银杏叶中含量较多，对抑制肿瘤细胞活性（如卵巢腺、前列腺、肺、脑和肾等癌细胞）、抑制淋巴细胞增殖、抗病毒活性（特别是疱疹病毒HSV-1和HSV-2）、中枢神经保护、脂细胞分解、舒张血管抗血栓、抗氧化、抗炎等药用方面活性效果显著。当前，银杏素货源短缺，价格昂贵，有潜在的市场开发前景。

由于银杏素的结构复杂，化学合成法比较困难，银杏素的制备工艺主要是从植物中提取的方法。CN102399207中以刺山柑果为原料，采用石油醚和氯仿得到提取液，经聚酰胺，葡聚糖凝胶和硅胶三种柱层析法得到纯度98%的银杏素。其提取工艺中有机溶剂用量多，纯化工艺操作繁琐。CN103044378以南方红豆杉叶为原料，采用超临界萃取得到提取液，操作压力30 MPa，经树脂和聚酰胺两种柱层析法得到纯度99%的银杏素。其提取工艺条件要求高，纯化工艺操作繁琐。CN102351825中以银杏叶为原料，采用乙醇和乙酸乙酯得到提取液，经石油醚反复重结晶和20 MPa下超临界流体脱溶结晶得到纯度98%的银杏素。其提取工艺中有机溶剂用量多，纯化工艺条件要求高。

发明内容

发明目的：本发明目的在于针对现有技术的不足，具体是：有机溶剂用量多，对环境不友好且银杏素提取液的获得的工艺条件要求高的问题，提供一种提取银杏素的方法。

本发明以银杏叶为原料，在水中提取，有机溶剂用量少，对环境友好，在纤维素酶法提取过程中，加入助溶剂，增加了银杏叶中低极性成分的溶解性，从而提高了银杏素的提取率。

技术方案：本发明的目的通过下述技术方案实现：

一种银杏素的提取方法，包括以下步骤：

1）银杏素提取液的制备：将干燥银杏叶粉加入到去离子水中并加入纤维素酶和助溶剂，在一定温度条件下进行提取，然后过滤得到滤液，即为银杏素提取液；

2）从步骤1）中获得的银杏素提取液中分离纯化银杏素。

优选的，步骤2）中从银杏素提取液中分离纯化银杏素的具体步骤如下：

S1、将银杏素提取液用二氯甲烷常温下萃取，并将下层溶液减压浓缩获得浓缩物A；

S2、将步骤S1获得的浓缩物A使用金属络合法纯化获得浓缩物B；

S3、将步骤S2获得的浓缩物B加入填有交联环糊精的层析柱中进行柱层析，先用体积比为20：1的石油醚和乙酸乙酯混合溶液洗脱得到洗脱液I，再用体积比为8：1的石油醚和乙酸乙酯混合溶液洗脱得到洗脱液II，洗脱液II减压浓缩得到浓缩物C，即为银杏提取物；环糊精是由多个D-吡喃葡萄糖单元通过α-1,4-糖苷键连接而成的环状化合物，环糊精分子中含有大量的羟基。其外表面一侧含C₆-OH，另一侧含C₂-OH和C₃-OH。内部含糖苷氧原子和氢原子。因此，环糊精具有“内疏水、外亲水”的结构，能与很多有机分子通过氢键、疏水相互作用等分子间弱相互作用，凭借不同有机分子的尺寸、形状、极性等性质的差异进行识别与之选择性结合，从而实现分离纯化的目的。

S4、重结晶：将步骤S3得到的银杏提取物加入丙酮和活性炭，搅拌并过滤，滤液自然冷却析出，得到纯度更高的银杏提取物；