[发明专利]一种利用羟基酸脱氢酶制备L-草铵膦的方法有效
| 申请号： | 201911337722.5 | 申请日： | 2019-12-23 |
| 公开（公告）号： | CN111019982B | 公开（公告）日： | 2021-10-15 |
| 发明（设计）人： | 杨立荣;周海胜;许金玲;吴坚平;张红玉 | 申请（专利权）人： | 浙江大学 |
| 主分类号： | C12P13/04 | 分类号： | C12P13/04 |
| 代理公司： | 杭州天勤知识产权代理有限公司 33224 | 代理人： | 沈金龙 |
| 地址： | 310013 浙江*** | 国省代码： | 浙江;33 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 利用 羟基 脱氢酶 制备 草铵膦 方法 | ||
1.一种利用羟基酸脱氢酶制备L-草铵膦的方法，其特征在于，以2-羟基-4-(羟基甲基膦酰基)丁酸为原料，经羟基酸脱氢酶和氨基酸脱氢酶两步催化制备L-草铵膦，
反应体系中加有辅酶，所述辅酶为NAD+，反应体系中辅酶的添加量为0.001～0.5mM。
2.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述羟基酸脱氢酶为羟基异己酸脱氢酶、乳酸脱氢酶或扁桃酸脱氢酶中的至少一种。
3.如权利要求2所述的方法，其特征在于，所述羟基酸脱氢酶为来源于甲烷球菌Methanocaldococcus jannaschii DSM 2661的L-羟基异己酸脱氢酶，氨基酸序列SEQ IDNO.1；或来源于德布鲁克乳杆菌Lactobacillus delbrueckii的D-羟基异己酸脱氢酶，氨基酸序列SEQ ID NO.2；或来源于链球菌Streptococcus的L-乳酸脱氢酶，氨基酸序列SEQ IDNO.3；或来源于短乳杆菌Lactobacillus brevis ATCC 367的D-扁桃酸脱氢酶，氨基酸序列SEQ ID NO.4。
4.如权利要求3所述的方法，其特征在于，反应体系中同时加入L-选择性羟基酸脱氢酶和D-选择性羟基酸脱氢酶。
5.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述氨基酸脱氢酶为亮氨酸脱氢酶、丙氨酸脱氢酶或谷氨酸脱氢酶中的至少一种。
6.如权利要求5所述的方法，其特征在于，所述氨基酸脱氢酶为来源于枯草芽孢杆菌Bacillus subtilis 168的亮氨酸脱氢酶，氨基酸序列SEQ ID NO.5；或来源于恶臭假单胞菌Pseudomonas putida KT2440的亮氨酸脱氢酶，氨基酸序列SEQ ID NO.6；或来源于绿色链霉菌Streptomyces viridochromogenes DSM40736的丙氨酸脱氢酶，氨基酸序列SEQ IDNO.7；或来源于艰难梭菌Clostridium difficile的谷氨酸脱氢酶，氨基酸序列SEQ IDNO.8。
7.如权利要求1所述的方法，其特征在于，反应体系中所述羟基酸脱氢酶的添加量为不少于100U/L；所述氨基酸脱氢酶添加量为不少于500U/L。
8.如权利要求1所述的方法，其特征在于，反应体系中，原料2-羟基-4-(羟基甲基膦酰基)丁酸的添加量为10～500mM，反应温度为30～45℃，控制反应pH值为7.5～9。
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