[发明专利]一种通关藤糖浆的HPLC含量测定方法

说明书

本发明涉及一种通关藤糖浆的HPLC含量测定方法，其色谱条件与系统适用性试验条件为，以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂的色谱柱；以乙腈A、甲醇B、0.1％磷酸/5％冰醋酸的酸混合液C为流动相进行梯度洗脱；检测波长200‑254nm；理论板数按苯甲酸钠、羟苯乙酯、山梨酸钾中的一种或多种计算应不低于1000；柱温30‑40℃；流速为1.5ml/min至2.5ml/min；本发明的有益效果在于，提供了同时测定通关藤糖浆中防腐剂的苯甲酸钠、羟苯乙酯、山梨酸钾中的一种或多种的含量测定方法，提高了通关藤糖浆的质量控制水平。

技术领域

本发明属于药物分析领域，特别涉及一种通关藤糖浆的HPLC含量测定方法。

背景技术

通关藤糖浆(消癌平糖浆)是由通关藤一味药材制备而成，然而现行的质量标准(WS3-B-3960-98-2019)中，仅仅以绿原酸计对通关藤进行了HPLC含量测定，其色谱条件与系统适用性试验条件为:以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，以乙腈-0.5％磷酸溶液(8:92)为流动相，检测波长324nm。然而，绿原酸是否在通关藤糖浆中起到主要抗癌作用尚缺乏证实，人们期望能够将通关藤中对癌症其作用的物质进行含量控制。CN103245746A对通关藤药材、中间体、注射液中的酚酸和甾体皂苷组分进行定性定量表征，采用了基本相同的色谱条件，通过不同梯度洗脱分别实现了没食子酸、香豆酸、隐绿原酸、新绿原酸、香草酸、绿原酸、丁香酸、阿魏酸，以及通关藤苷A、通关藤苷F、通关藤苷元B、17β通关藤苷元B的分离和定量。然而，该方法的再现性并未得到证实，在很多色谱峰没有完全分离的情况下，定量误差较大。上述方法，及通光藤糖浆的现行质量标准中的HPLC方法，不能有效的对防腐剂的进行质量控制。因此，现有技术需要对防腐剂的用量进行质量控制。

发明内容

本发明提供一种通关藤糖浆的HPLC含量测定方法，包括同时测定通关藤糖浆中的防腐剂苯甲酸钠、羟苯乙酯、山梨酸钾中的一种或几种的含量测定方法，具体包括如下步骤：

色谱条件与系统适用性试验以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂的色谱柱；以乙腈A、甲醇B、0.1％磷酸/5％冰醋酸的酸混合液C为流动相进行梯度洗脱；检测波长200-254nm；理论板数按苯甲酸钠、羟苯乙酯、山梨酸钾中的一种或多种计算应不低于1000；柱温30-40℃；流速为1.5ml/min至2.5ml/min；

对照品溶液的制备取苯甲酸钠、羟苯乙酯、山梨酸钾中的一种或多种对照品适量，精密称定，加50％甲醇制成每1ml含苯甲酸钠、羟苯乙酯、山梨酸钾的一种或多种各1-10μg的溶液，即得；

供试品溶液的制备取WS3-B-3960-98-2019标准的装量项下的本品，混匀，精密量取10ml，置具塞锥形瓶中，精密加入50％甲醇25ml，密塞，称定重量，超声处理(功率250W，频率40kHz)40分钟，放冷，再称定重量，用50％甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得。

本发明的有益效果在于，提供了同时测定通关藤糖浆中防腐剂的苯甲酸钠、羟苯乙酯、山梨酸钾中的一种或多种的含量测定方法，提高了通关藤糖浆的质量控制水平。

附图说明

图1加样实验对照品的HPLC色谱图；

图2加样实验供试品的HPLC色谱图；

图3试验例对照品的HPLC色谱图；

图4试验例供试品的HPLC色谱图。

具体实施方式

在通常的实施方式中，本发明所要求保护的含量测定方法采用的HPLC(高效液相)方法，进行的色谱条件、系统适用性试验、对照品制备和供试品制备等必要的线性关系、重现性、稳定性均在本发明的构思之内，且按照药监部门法定的方法学考察即可，本发明不做具体限定。