[发明专利]复方丹参制剂七种成分血浆或组织浓度的质谱检测方法

权利要求书

1.一种复方丹参制剂七种成分血浆或组织浓度的高效液相色谱串联质谱检测方法，其特征在于，所述复方丹参制剂由包括丹参、三七和冰片的原料制备而成；包括以下步骤：

（1）储备溶液的制备：

取标准品丹参酮I、丹参酮IIA、丹酚酸B、丹参素、三七皂苷R₁、人参皂苷Rg₁和Rb₁，分别溶解于80±5%甲醇水溶液中，制得标准品储备溶液；将标准品储备溶液混合，得到混合标准品储备溶液；

取卡马西平溶解于80±5%甲醇水溶液中，制得卡马西平储备溶液；

（2）工作溶液的制备：

分别用80±5%甲醇水溶液稀释所述混合标准品储备溶液，制得混合标准曲线样本工作溶液和混合质控样本工作溶液；

用80±5%甲醇水溶液稀释所述卡马西平储备溶液，制得内标工作溶液；

（3）待测样品溶液的制备：

待测血浆样品溶液的制备：取血浆样品，加入内标工作溶液和甲醇，离心，取所得上清液作为待测血浆样品溶液；

待测组织样品溶液的制备：取组织样品，匀浆，在所得匀浆液中加入内标工作溶液和甲醇，离心，取所得上清液作为待测组织样品溶液；

（4）将步骤（3）所得待测样品溶液进行液相色谱分离；将液相色谱分离后的样品进行质谱分析；

所述液相色谱分离所采用的洗脱方式为：以0.1±0.02%甲酸水溶液为流动相A，以甲醇为流动相B，进行梯度洗脱；所采用的液相色谱柱为：XBridge BEH C18 UPLC Column；

所述梯度洗脱的过程包括：

0～0.5分钟， (10±5)%流动相A-(90±5)流动相B；

0.5～2.0分钟， (5±5)%流动相A-(95±5)流动相B；

2～2.2分钟， (90±5)%流动相A-(10±5)流动相B；

2.2～3.0分钟，(90±5)%流动相A-(10±5)流动相B；

其中，所述质谱分析的条件包括：

离子化模式：电喷雾离子源；正离子模式；多反应监测；

离子源参数：气帘气：25psi；离子源气体1：50psi；离子源气体2：50psi；

离子源喷雾电压：5500±10V；

离子源温度：550±10℃；

分辨率Q1/Q3：Unit/Unit；

碰撞气：Medium；

暂停时间：20±1 msec；

质谱采集时间为3.00±0.2min。

2.根据权利要求1所述的高效液相色谱串联质谱检测方法，其特征在于，所述液相色谱的色谱条件包括：

流速：0.3±0.1mL/min；

进样体积：3.00±0.5μL；

柱温：40±5℃；

自动进样器温度：15±3℃；

洗针液： 50±5%甲醇水溶液；

洗冲速度：30-40μL/sec；

洗针液体积：400-600μL。