[发明专利]复方丹参制剂七种成分血浆或组织浓度的质谱检测方法

说明书

本发明涉及一种复方丹参制剂七种成分血浆或组织浓度的质谱检测方法。该方法包括以下步骤：(1)储备液的制备：取标准品丹参酮I、丹参酮IIA、丹酚酸B、丹参素、三七皂苷R₁、人参皂苷Rg₁和Rb₁，分别溶解于(80±5)％甲醇水溶液中，制得标准品储备溶液；取卡马西平溶解于(80±5)％甲醇水溶液中，制得卡马西平储备溶液；(2)工作溶液的制备；(3)待测样品溶液的制备；(4)将步骤(3)所得待测样品溶液进行液相色谱分离；将液相色谱分离后的样品进行质谱分析。本发明方法的检测过程中色谱峰形极佳，每个化合物的通道都只有唯一的目标峰，避免了其他如溶剂效应等的干扰，操作简单、分析快速、特异性高、分离度高。

技术领域

本发明涉及药物分析技术领域，特别是涉及一种复方丹参制剂七种成分血浆或组织浓度的质谱检测方法。

背景技术

复方丹参制剂由丹参、三七和冰片3味中药组成，剂型共有9种：复方丹参口服液、复方丹参气雾剂、复方丹参含片、复方丹参胶囊、复方丹参片、复方丹参颗粒、复方丹参滴丸、复方丹参喷雾剂、复方丹参软胶囊。复方丹参制剂具有活血化瘀、理气止痛之功效，用于气滞血瘀所致的胸痹，症见胸闷、心前区刺痛、冠状动脉粥样硬化性心脏病心绞痛见上述证候者。临床应用中单用复方丹参制剂发生不良反应的发生率约为5～7％。其不良反应表现复杂多样，体内代谢个体差异大,主要为胃肠道反应、头痛和出血等。大部分不良反应为病人可耐受的轻微损伤、出血等；少部分不良反应需要停药对症处理；且复方丹参制剂的疗效和不良反应与血浆中药物浓度密切相关，需要根据血药浓度调整给药方案，故有必要对其进行血药浓度监测。

药典中规定的复方丹参制剂的含量测定方法为高效液相色谱法，包括丹参酮IIA和丹酚酸B的含量测定方法和三七项下的人参皂苷Rg₁、人参皂苷Rb₁、三七皂苷R₁和人参皂苷Re的测定方法。但是，上述药典中规定分析方法涉及大量的化学预处理步骤，操作相对繁琐，特别是丹参酮IIA的含量测定供试品前处理和标定，耗时较长，给实际工作带来许多不便。

目前，复方丹参制剂血药浓度测定的常见方法有：高效液相色谱法和液相色谱-质谱联用法。由于复方丹参制剂七种成分性质差异较大，包含水溶性成分(丹酚酸B、丹参素、三七皂苷R₁、人参皂苷Rg₁、人参皂苷Rb₁)和脂溶性成分(丹参酮I和丹参酮IIA)，而且含量相差较大，因此很难用一种前处理方法进行处理并检测。导致现在对复方丹参制剂主要成分检测方法的研究通常采取对于不同成分分开进行前处理和检测的方法，过程复杂，步骤繁琐。

发明内容

基于此，本发明的目的之一是提供一种复方丹参制剂七种成分的血浆浓度或组织分布的高效液相色谱串联质谱检测方法，该检测方法操作简单、分析快速、特异性高、分离度高。

具体技术方案如下：

一种复方丹参制剂七种成分的血浆浓度或组织分布的高效液相色谱串联质谱检测方法，包括以下步骤：

(1)储备溶液的制备：

取标准品丹参酮I、丹参酮IIA、丹酚酸B、丹参素、三七皂苷R₁、人参皂苷Rg₁和Rb₁，分别溶解于(80±5)％甲醇水溶液中，制得标准品储备溶液；将标准品储备溶液混合，得到混合标准品储备溶液；

取卡马西平溶解于(80±5)％甲醇水溶液中，制得卡马西平储备溶液；

(2)工作溶液的制备：

分别用(80±5)％甲醇水溶液稀释所述混合标准品储备溶液，制得混合标准曲线样本工作溶液和混合质控样本工作溶液；

用(80±5)％甲醇水溶液稀释所述卡马西平储备溶液，制得内标工作溶液；

(3)待测样品溶液的制备：