[发明专利]一种维格列汀中间体-5的HPLC检测方法

说明书

本发明涉及药物检测技术领域，具体公开一种维格列汀中间体‑5的HPLC检测方法。所述HPLC的色谱条件：色谱柱：填充剂为十八烷基硅烷键合硅胶；流动相：流动相A为体积比为200:3‑5:3‑5的磷酸盐缓冲液‑乙腈‑甲醇；流动相B为体积比为80:90‑100:25‑35的磷酸盐缓冲液‑乙腈‑甲醇；柱温：33‑37℃；检测波长：208‑212nm；流速：1.6‑1.8ml/min；洗脱方式为梯度洗脱。本发明得到的色谱图中各色谱峰可以完全分离，且分离度良好，能够保证样品中维格列汀中间体‑5纯度检测的准确性，为后续合成的维格列汀的质量和疗效提供可靠保障。

技术领域

本发明涉及药物检测技术领域，尤其涉及一种维格列汀中间体-5的HPLC检测方法。

背景技术

维格列汀(Vildagliptin)是一种二肽基肽酶Ⅳ抑制剂，它是一种新型口服治疗糖尿病的药物。而维格列汀中间体-5是维格列汀合成过程中关键中间体之一，其化学名称为：S-1-(2-氯乙酰基)吡咯烷-2-甲腈，分子式为：C7H9ClN2O；分子量为：172.61；维格列汀中间体-5化学结构式如下：

在合成维格列汀中间体-5的过程中，伴随着生成了对甲苯磺酸，若对甲苯磺酸去除不完全则会影响维格列汀中间体-5的纯度和质量，而且，残留的对甲苯磺酸可能会参与到后续的反应中生成基因毒性杂质，从而对产品质量带来更大的影响。此外，中间体-5后处理过程中会发生水解，生成杂质中间体-5酰胺，同时中间体-5中还含有少量的未知单杂(WZ5-1)。因此检测和控制维格列汀中间体-5的纯度和对甲苯磺酸以及中间体-5酰胺的含量对于维格列汀的质量和疗效的控制格外重要。

发明内容

针对现有合成维格列汀中间体-5的过程中，会产生对甲苯磺酸和中间体-5酰胺等杂质，用其合成的维格列汀的质量和疗效难以保障的问题，本发明提供一种维格列汀中间体-5的HPLC检测方法。

为达到上述发明目的，本发明实施例采用了如下的技术方案：

一种维格列汀中间体-5的HPLC检测方法，所述HPLC的检测条件：

色谱柱：填充剂为十八烷基硅烷键合硅胶；

流动相：流动相A为体积比为200:3-5:3-5的磷酸盐缓冲液-乙腈-甲醇；流动相B为体积比为80:90-100:25-35的磷酸盐缓冲液-乙腈-甲醇；其中，所述磷酸盐缓冲液的pH为2-3；

柱温：33-37℃；

检测波长：208-212nm；

流速：1.6-1.8ml/min；

洗脱条件：0-3min，A相90→70vol％，B相10→30vol％；3-10min，A相70→55vol％，B相30→45vol％；10-18min，A相55vol％，B相45vol％；18-18.1min，A相55→90vol％，B相45→10％；18.1-22min，A相90vol％，B相10vol％。

相对于现有技术，本发明提供的格列汀中间体-5的HPLC检测方法，通过选择上述HPLC色谱条件，可实现对合成的维格列汀中间体-5粗品中维格列汀中间体-5、对甲苯磺酸和中间体-5酰胺的含量进行准确的检测，检测得到的高效液相色谱图中对甲苯磺酸与中间体-5的分离度在2.5以上，各杂质峰对主峰无干扰，各色谱峰可以完全分离，且分离度良好，能够保证样品中维格列汀中间体-5纯度检测的准确性，为后续合成的维格列汀的质量和疗效提供可靠保障。

优选的，所述色谱柱为AgelaVenusil MP C18柱。

采用AgelaVenusil MP C18柱，配合磷酸盐缓冲液-乙腈-甲醇作为流动相，可以进一步HPLC检测图谱各共有峰之间的分离度并保证良好的峰形。