[发明专利]检测三种无花果病毒的引物组合、试剂盒及其应用有效
申请号: | 201911344954.3 | 申请日: | 2019-12-23 |
公开(公告)号: | CN112501350B | 公开(公告)日: | 2023-08-01 |
发明(设计)人: | 麦合木提江·米吉提;吐逊艾力·艾孜提力;李世访;侯婉莹;张志想;郭庆元 | 申请(专利权)人: | 新疆农业大学 |
主分类号: | C12Q1/70 | 分类号: | C12Q1/70;C12Q1/686;C12R1/94 |
代理公司: | 北京纪凯知识产权代理有限公司 11245 | 代理人: | 白凤莹 |
地址: | 830052 新疆维吾尔自*** | 国省代码: | 新疆;65 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 检测 无花果 病毒 引物 组合 试剂盒 及其 应用 | ||
1.检测三种无花果病毒的引物组合,其特征在于:所述引物组合包括用于检测无花果斑点相关病毒的引物对1、用于检测无花果叶斑相关病毒的引物对2和用于检测无花果花叶病毒的引物对3;
所述引物对1由引物FFkaV-F和引物FFkaV-R组成:
所述引物FFkaV-F为SEQ ID NO.1所示的单链DNA分子;所述引物FFkaV-R为SEQ IDNO.2所示的单链DNA分子;
所述引物对2由引物FLMaV-F和引物FLMaV-R组成:
所述引物FLMaV-F为SEQ ID NO.3所示的单链DNA分子;所述引物FLMaV-R为SEQ IDNO.4所示的单链DNA分子;
所述引物对3由引物FMV-F和引物FMV-R组成:
所述引物FMV-F为SEQ ID NO.5所示的单链DNA分子;所述引物FMV-R为SEQ ID NO.6所示的单链DNA分子;
所述三种无花果病毒为无花果斑点相关病毒、无花果叶斑相关病毒和无花果花叶病毒。
2.根据权利要求1所述的引物组合,其特征在于:所述引物对1、引物对2和引物对3的摩尔比为10:10:3,其中,所述引物对1中引物FFkaV-F和引物FFkaV-R的摩尔比为1:1;所述引物对2中引物FLMaV-F和引物FLMaV-R的摩尔比为1:1;所述引物对3中引物FMV-F和引物FMV-R的摩尔比为1:1。
3.检测三种无花果病毒的试剂盒,其特征在于:所述试剂盒包含权利要求1或2所述的引物组合。
4.权利要求3所述的试剂盒的制备方法,其特征在于:所述制备方法包括将权利要求1或2中引物组合中各引物对的各条引物分别单独包装的步骤。
5.权利要求1或2所述的引物组合或权利要求3所述的试剂盒在如下任一中的应用:
A1)制备用于检测待测样品中是否含有三种无花果病毒的产品;
A2)检测待测样品中是否含有三种无花果病毒;
A3)制备用于鉴定三种无花果病毒的产品;
A4)鉴定三种无花果病毒;
所述三种无花果病毒为无花果斑点相关病毒、无花果叶斑相关病毒和无花果花叶病毒。
6.检测待测样品中是否含有三种无花果病毒的方法,其特征在于,所述方法包括如下步骤:
以待测样品的cDNA为模板,采用权利要求1或2所述的引物组合或权利要求3所述的试剂盒进行RT-PCR扩增,得到RT-PCR扩增产物;
若所述RT-PCR扩增产物中含有大小为626bp的条带,则所述待测样品含有无花果斑点相关病毒;反之则所述待测样品不含有无花果斑点相关病毒;
若所述RT-PCR扩增产物中含有大小为417bp的条带,则所述待测样品含有无花果叶斑相关病毒;反之则所述待测样品不含有无花果叶斑相关病毒;
若所述RT-PCR扩增产物中含有大小为219bp的条带,则所述待测样品含有无花果花叶病毒;反之则所述待测样品不含有无花果花叶病毒;
所述三种无花果病毒为无花果斑点相关病毒、无花果叶斑相关病毒和无花果花叶病毒。
7.鉴定待测病毒是否为三种无花果病毒的方法,其特征在于,所述方法包括如下步骤:
以待测病毒的cDNA为模板,采用权利要求1或2所述的引物组合或权利要求3所述的试剂盒进行RT-PCR扩增:
若所述RT-PCR扩增产物中含有大小为626bp的条带,则所述待测病毒为无花果斑点相关病毒;反之则所述待测样品不为无花果斑点相关病毒;
若所述RT-PCR扩增产物中含有大小为417bp的条带,则所述待测病毒为无花果叶斑相关病毒;反之则所述待测样品不为无花果叶斑相关病毒;
若所述RT-PCR扩增产物中含有大小为219bp的条带,则所述待测病毒为无花果花叶病毒;反之则所述待测样品不为无花果花叶病毒;
所述三种无花果病毒为无花果斑点相关病毒、无花果叶斑相关病毒和无花果花叶病毒。
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