[发明专利]一种可测定大黄蛰虫制剂及其原料的指纹图谱检测方法

说明书

本发明公开了一种指纹图谱检测方法，该方法包括供试品溶液的制备、对照品溶液的制备、指纹图谱的建立等内容。本发明针对现有技术检测方法的诸多不足，通过大量实验筛选出最佳的提取溶剂、流动相组成，检测波长等分析条件，经多次实验验证表明，本发明提供的检测方法，可建立良好的指纹图谱。采用本发明提供的指纹图谱检测方法，可以同时检测大黄药材、黄芩药材、大黄蛰虫丸及大黄蛰虫胶囊的特征成分，从而可以全面、客观、准确的检测和评价原料药材及成品制剂的质量，为保证临床疗效具有重要意义。

技术领域

本发明涉及一种指纹图谱检测方法，具体涉及原料药材大黄、黄芩及大黄蛰虫制剂的指纹图谱的检测方法。

背景技术

从2000年起正式推行中药指纹图谱，以控制中药质量。对于中药而言，指纹图谱不同于传统的检测技术之处是在于它不是从一个“点”来控制质量，而是从某一个“面”来评价中药质量，而且带有“量化”的概念。大黄蛰虫相关制剂是由熟大黄、土鳖虫（炒）、水蛭(制)、虻虫(去翅足，炒)、蛴螬(炒)、干漆（锻）、桃仁、炒苦杏仁、黄芩、地黄、白芍、甘草十二味中药制成，常见剂型有胶囊剂和丸剂，具有活血破瘀，通经消癥的作用。用于淤血内停所致的癥瘕、闭经、症见腹部肿块、肌肤甲错、面色黯黑、潮热羸瘦、经闭不行。该复方药味复杂，含有化学成分多样。现有技术的分析方法不能全面、客观地检测和评价大黄蛰虫相关制剂的质量。

发明内容

发明目的:本发明的目的是解决现有技术的不足，提供一种指纹图谱检测方法，该检测方法可以同时用于检测原料药材大黄、黄芩及大黄蛰虫相关制剂中的特征成分，可以客观、全面、准确的评价药材及大黄蛰虫制剂的质量，对控制原料和制剂的内在质量与保证临床疗效具有重要意义。

技术方案:为了实现以上技术目的，本发明采取的技术方案为:

一种指纹图谱检测方法，该指纹图谱检测方法包括以下步骤:

(1) 原料药材供试品溶液制备:取大黄、黄芩药材适量，粉碎，各取0.5g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入50%乙醇溶液30ml，密塞，称定重量，超声处理30分钟，放冷，再称定重量，用50%乙醇补足减失的重量，摇匀滤过，取续滤液，制成原料药材供试品溶液；

(2) 大黄蛰虫丸供试品溶液制备:取大黄蛰虫丸粉末，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入50%乙醇溶液50ml，密塞，称定重量，超声处理30分钟，放冷，再称定重量，用50%乙醇补足减失的重量，摇匀滤过，取续滤液，制成制剂供试品溶液；

（3）大黄蛰虫胶囊供试品溶液制备:取大黄蛰虫胶囊，研细，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入50%乙醇溶液50ml，密塞，称定重量，超声处理30分钟，放冷，再称定重量，用50%乙醇补足减失的重量，摇匀滤过，取续滤液，制成制剂供试品溶液；

(4)对照品溶液的制备:精密称取黄芩苷、黄芩素、芦荟大黄素、大黄酸、大黄素、大黄酚、大黄素甲醚对照品，用甲醇溶解，配置成适宜浓度的混合对照品储备液；

（5）高效液相色谱法同时测定原料药材大黄、黄芩、大黄蛰虫丸及大黄蛰虫胶囊的对照指纹图谱：取以上供试品在适当的色谱条件下进样，测得各供试品的指纹图谱，以这些指纹图谱为基础，用相似度软件计算获得共有模式作为本品的对照指纹图谱；

(6) 取对照品溶液按步骤（5)相同的色谱条件进样，测得各对照品溶液的高效液相图谱；

(7) 高效液相色谱法测定供试品溶液指纹图谱:取步骤(1)、步骤（2）、步骤（3）供试品溶液按步骤（5)相同的色谱条件进样，测得供试品溶液的指纹图谱；并根据步骤(6)所得对照品溶液的高效液相图谱归属各色谱峰；

(8)将步骤(7)得到的供试品溶液指纹图谱和步骤(6)得到的对照指纹图谱用相似度软件评价。