[发明专利]合成水杨苷的工程菌及其构建方法和应用有效
申请号: | 201911347111.9 | 申请日: | 2019-12-24 |
公开(公告)号: | CN113025541B | 公开(公告)日: | 2022-08-12 |
发明(设计)人: | 申晓林;袁其朋;赵千婧 | 申请(专利权)人: | 北京化工大学 |
主分类号: | C12N1/21 | 分类号: | C12N1/21;C12P19/44;C12R1/19 |
代理公司: | 郑州德勤知识产权代理有限公司 41128 | 代理人: | 王莉 |
地址: | 100013 *** | 国省代码: | 北京;11 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 合成 水杨 工程 及其 构建 方法 应用 | ||
1.一种合成水杨苷的工程菌,其特征在于:包括宿主和重组质粒载体,该重组质粒载体上连接有表达编码来源于秋田小町水稻的水杨酸葡萄糖基转移酶(OsSGT1)的基因;所述宿主为大肠杆菌菌株BW25113。
2.一种合成水杨苷的工程菌的应用,包括:按照体积比1%~5%的接种量,将权利要求1所述的合成水杨苷的工程菌接种到培养基中,并向所述培养基中加入300 mg/L~500 mg/L水杨醇,在28℃~40℃进行发酵处理,制得水杨苷。
3.一种合成水杨苷的工程菌,其特征在于:包括宿主和重组质粒载体,该重组质粒载体上连接有共表达的编码羧酸还原酶、磷酰转移酶和来源于秋田小町水稻的水杨酸葡萄糖基转移酶(OsSGT1)的基因;所述宿主为大肠杆菌菌株BW25113。
4.一种合成水杨苷的工程菌的应用,包括:按照体积比1%~5%的接种量,将权利要求3所述的合成水杨苷的工程菌接种到培养基中,并向所述培养基中加入100 mg/L~600 mg/L水杨酸,在28℃~40℃进行发酵处理,制得水杨苷。
5.一种合成水杨苷的工程菌,其特征在于:包括宿主和重组质粒载体,该重组质粒载体上连接有共表达的编码异分支酸丙酮酸裂解酶、异构分支酸合酶、羧酸还原酶、磷酰转移酶和来源于秋田小町水稻的水杨酸葡萄糖基转移酶(OsSGT1)的基因;所述宿主为大肠杆菌菌株BW25113。
6.根据权利要求5所述的合成水杨苷的工程菌,其特征在于:所述重组质粒载体还连接有过表达编码莽草酸激酶、丙酮酸激酶、转酮酶和3-脱氧-7-磷酸庚酸合酶的基因。
7.根据权利要求5或6所述的合成水杨苷的工程菌,其特征在于:所述宿主同时敲除了编码
8.一种合成水杨苷的工程菌的构建方法,包括步骤:
重组表达质粒将编码异分支酸丙酮酸裂解酶、异构分支酸合酶、羧酸还原酶、磷酰转移酶和来源于秋田小町水稻的水杨酸葡萄糖基转移酶(OsSGT1)的基因连接至表达质粒上,获得重组质粒载体;
构建工程菌将所述重组质粒载体转化到宿主中,得到合成水杨苷的工程菌;所述宿主为大肠杆菌菌株BW25113。
9.根据权利要求8所述的合成水杨苷的工程菌的构建方法,其特征在于:所述重组表达质粒的步骤还进一步包括采用中拷贝所述表达质粒共表达编码莽草酸激酶、丙酮酸激酶、转酮酶和3-脱氧-7-磷酸庚酸合酶的基因。
10.一种合成水杨苷的工程菌的应用,包括:按照体积比1%~5%的接种量,将权利要求5~7任一项所述的合成水杨苷的工程菌接种到培养基中,在28℃~40℃进行发酵处理,制得水杨苷。
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